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詳細(xì)介紹
人前脂肪原代細(xì)胞?細(xì)胞
人前脂肪細(xì)胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成，聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細(xì)胞：一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細(xì)胞；另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞呈梭形，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形，已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪細(xì)胞是一類具有增殖和向脂肪細(xì)胞分化能力的特異化前體細(xì)胞，與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細(xì)胞是一種類成纖維細(xì)胞，在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì)，終成為成熟的脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞對外界機(jī)械損傷的抵抗力較強(qiáng)，可望成為軟組織缺損的有益填充物。
英文名稱 | Human Preadipocyte Cells | 組織來源 | 脂肪組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7367 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人前脂肪細(xì)胞
組織來源：脂肪組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人前脂肪采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人前脂肪經(jīng)油紅O染色檢測，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d | LF/LTF ELISA Kit 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf141： 1號染色體開放閱讀框141抗體 0.2ml | GLP-2： 胰高血糖素樣肽-2抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CENPF 有絲分裂著絲粒蛋白F抗體 規(guī)格 0.2ml | PCDHA3： 原鈣粘附蛋白α3抗體 0.2ml |
Anti-NOS-2/iNOS /FITC 熒光素標(biāo)記合成酶-2抗體(誘導(dǎo)型)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GAPDH 3-0酸甘油醛脫氫酶(人)抗原 0.5mg |
Goat Anti-human Fibrinogen/Gold 金標(biāo)記羊抗(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | MAL2： T淋巴細(xì)胞分化蛋白MAL2抗體 0.2ml |
IL17RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL17RA / IL17R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | Promocell C-22162 Smooth Muscle Cell GrowthMedium 2 KIT, 平滑肌細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml |
人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HCPECL | RSPO3 Others Human 人 RSPO3 / R-spondin 3 (aa 1-146) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Hela(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0426RKO-E6(人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5 | CD79B Others Mouse 小鼠 CD79B / B29 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
H-97(人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | Y1小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞 Y1 mouse adrenocortical tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS |
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFa | 人前脂肪原代細(xì)胞PCDHA3： 原鈣粘附蛋白α3抗體 0.2ml |
CRFK細(xì)胞，貓腎細(xì)胞 結(jié)直腸癌細(xì)胞,LOVE1細(xì)胞 CM-H069人膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 人間充質(zhì)干細(xì)胞(骨髓)cDNAHMSC-bm cDNA |
人支氣管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
MDA-MB-157(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 R 1610(中國倉鼠體細(xì)胞) | Anti-IL-7/FITC 熒光素標(biāo)記白介素7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-ROCK1 Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | BT549細(xì)胞，管癌細(xì)胞 人喉癌細(xì)胞,M4e細(xì)胞 大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1) |
Rhesus antibody Rh phospho-Nrf2 (Ser40) 0酸化核因子2相關(guān)因子2(Ser40)抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHDC9 KLHDC9蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
Mouse small nuclear ribonucleoprotein,snRNP/Sm ELISA Kit 小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體 96T | IL17RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL17RA / IL17R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
人前脂肪原代細(xì)胞
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