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詳細(xì)介紹
人神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞
人星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自腦組織；大腦分左右兩個(gè)半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分，它是元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面，即外側(cè)面（約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。星形膠質(zhì)細(xì)胞，是哺乳動(dòng)物腦內(nèi)分布廣泛的一類(lèi)細(xì)胞，也是膠質(zhì)細(xì)胞中體積大的一種。用經(jīng)典的金屬浸鍍技術(shù)（銀染色）顯示此類(lèi)膠質(zhì)細(xì)胞呈星形，從胞體發(fā)出許多長(zhǎng)而分支的突起，伸展充填在細(xì)胞的胞體及其突起之間，起支持和分隔細(xì)胞的作用。細(xì)胞突起的末端常膨大形成腳板或稱(chēng)終足，有些腳板貼附在鄰近的毛細(xì)血管壁上，因此這些腳板又被稱(chēng)為血管足或血管周足，靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內(nèi)表面，彼此連接構(gòu)成膠質(zhì)界膜。細(xì)胞剛分離時(shí)呈圓形，24h后大部分細(xì)胞貼壁，均勻分布于瓶底，部分細(xì)胞伸出細(xì)小突起，培養(yǎng)4-5d后細(xì)胞數(shù)量明顯增多，呈扁平、多角形，胞質(zhì)豐富且核漿較少，細(xì)胞核呈橢圓形，偏于胞體一側(cè)。星形膠質(zhì)細(xì)胞是中樞系統(tǒng)的重要細(xì)胞組成，不僅具有支持功能，還能夠合成及分泌多種活性物質(zhì)，在維持元內(nèi)外環(huán)境、生存、遷移、免疫調(diào)節(jié)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、軸突生長(zhǎng)及功能整合等方面具有重要作用。
英文名稱(chēng) | Human Astrocyte Cells | 組織來(lái)源 | 腦組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7390 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱(chēng)：人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞
組織來(lái)源：腦組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人星形膠質(zhì)采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
雪旺細(xì)胞培養(yǎng)基SCM-prf | Anti-TSHB 促甲狀腺素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml |
PP(Human Protein Phosphatase) ELISA Kit 人蛋酸酶 96T | Anti-Phospho-MYPT1 (Thr853) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化肌球蛋酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TIMP-1(NT) 金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(N端) 規(guī)格 0.1ml | NSE(Human Neuron-specific enolase) ELISA Kit 人特異性烯醇化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
phospho-HRH1(Ser398)： 0酸化組胺受體H1抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh CC85C 卷曲螺旋域蛋白質(zhì)85C抗體 規(guī)格 0.2ml |
FBXW5： FBXW5蛋白抗體 0.2ml | E ELISA Kit 大鼠雌激素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
KITLG Others Human 人 SCF / C-kit ligand (aa 1-189 ) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 轉(zhuǎn)化細(xì)胞 人卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞RNAHCPF miRNA5 μg | KYNU Others Human 人 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 C6(腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞) | CD200 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
Promocell C-24300 Melanocyte Growth Medium M2, 黑色素細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基M2型(即用型) 500ml | FABP4 Others Mouse 小鼠 FABP4 / ALBP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
T-110B透明質(zhì)酸酶(含100mL酶解緩沖液)10mL | 人神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞NSE(Human Neuron-specific enolase) ELISA Kit 人特異性烯醇化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
LILRB3 Others Human 人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | OVCaR-3 人卵巢癌細(xì)胞 |
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI] | 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人腎癌細(xì)胞，A-704細(xì)胞 AGS(胃腺癌細(xì)胞) |
RK1 Others Canine 狗 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Anti-PSD-95/FITC 熒光素標(biāo)記突觸后密度蛋白95抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
ompF： 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗體 1ml | ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACII / ACVR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
Spectrin alpha chain, non-erythrocytic 1： 血影蛋白A鏈非紅細(xì)胞型/收縮蛋白/Spectrin α抗體 0.1ml | CACNB1： 鈣通道電壓依賴(lài)性β1蛋白抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Bio 標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml | KITLG Others Human 人 SCF / C-kit ligand (aa 1-189 ) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi)；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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