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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人胎盤間充質干采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人胎盤間充質干經CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 人胎盤間充質干原代細胞 | 組織來源 | 胎盤組織 |
英文名稱 | Human Placental Mesenchymal Stem Cells | 貨號 | YS-01X7607 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人胎盤間充質干細胞細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤。胎盤間充質干細胞（mesenchymal stem cell，MSC）是一種多能干細胞，是具有自我復制能力的多潛能細胞。在一定條件下，它可以分化成多種功能細胞像APSC多能細胞。在胚胎發(fā)育中來源于中胚層。在機體正常的組織損傷修復過程中，MSC是一種重要的參與組織再生的細胞庫。在組織損傷引起的特殊信號作用下，MSC遷移到受損部位，在局部聚集增殖，依據不同的損傷信號沿著不同途徑分化。MSC易于分離擴增，體外倍增能力旺盛，能保持其多向分化能力。因此，MSC是一種實用的組織修復種子細胞。相較于其他干細胞，胎盤間充質干細胞具有來源方便，細胞數量充足，易于分離、培養(yǎng)、擴增和純化，傳代擴增多代后仍具有干細胞特性。胎盤是干細胞的佳來源。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產品：
興國鯉尾鰭細胞;XGL | Anti-TSHR (NT) 促甲狀腺素受體抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
SDH(Human sorbitol dehydrogenase) ELISA Kit 人山脫氫酶 96T | Anti-MYL3/Myosin light chain 3/Biotin 標記 肌球蛋白輕鏈3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TIGAR TIGAR蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | PG-C(Human Pepsinogen C) ELISA Kit 人原CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T |
HDHD2： HDHD2蛋白抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh CBP/p300 CREB結合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml |
phospho-FAK(Ser732)： 0酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml | f- BetaCG ELISA Kit 大鼠游離β絨毛膜Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) | BEL-7405(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人真皮成纖維母細胞-新生HDF-n |
人淋巴內皮細胞cDNAHLEC cDNA | CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CD3D Others Human 人 CD3D 人細胞裂解液 (陽性對照) | CLDN11 Others Human 人 CLDN11 / Claudin-11 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CD2 Others Human 人 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) | SLAMF7 Others Human 人 SLAMF7 / CRACC / CD319 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SV-40轉化肺成纖維細胞;WI38/VA13 | 人胎盤間充質干原代細胞PG-C(Human Pepsinogen C) ELISA Kit 人原CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T |
COMP Others Human 人 COMP 人細胞裂解液 (陽性對照) | 家貓肺細胞;FCA-L1 |
IGFBP3 Protein Human 重組人 IGFBP3 / IBP3 蛋白 (His 標簽) | 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2 人癌細胞，HCC1428細胞 LTEP-a-2(肺腺癌細胞) |
PROCR Others Mouse 小鼠 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-PSP/FITC 熒光素標記抗PSP抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
OAS1： 寡腺苷酸合成酶-1 0.1ml | TNFRSF25 Others Human 人 TNFRSF25 / DDR3 / APO3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SPC25： 紡錘體極點構成蛋白25抗體 0.2ml | CKAP4： 細胞骨架相關蛋白4抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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