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詳細(xì)介紹
人胎盤絨毛膜原代細(xì)胞
人胎盤絨毛膜細(xì)胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后，在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起，以細(xì)胞滋養(yǎng)層為中軸，外裹合體滋養(yǎng)層，稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸，使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織，并與胚體內(nèi)的血管相通時(shí)，次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞形成細(xì)胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育，叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤，而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。
英文名稱 | Human Placental Chorionic Cells | 組織來源 | 胎盤組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7205 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人胎盤絨毛膜細(xì)胞
組織來源：胎盤組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胎盤絨毛膜采用-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胎盤絨毛膜經(jīng)hCG免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
KB-C1.5細(xì)胞，細(xì)胞 人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,Jurkat D,E細(xì)胞 人喉癌上皮細(xì)胞;Hep-2 | AICDA： 活化誘導(dǎo)胞嘧啶核苷脫酶抗體 0.2ml |
Anti-Heme Oxygenase 1/HO-1 血紅素氧合酶 1/熱休克蛋白32抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABCA9 三0酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-cath-H/CH /FITC 熒光素標(biāo)記組織蛋白酶H抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IDE 胰島素降解酶抗體 規(guī)格 0.2ml |
IRS-4 胰島素受體底物-4(抗原) 0.5mg | HSP1： P1抗體 0.2ml |
IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM123B/AMER1/Wilms tumor on the X 腎母細(xì)胞瘤基因X染色體蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
769-P(人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8 |
Bel-7404細(xì)胞，人肝癌細(xì)胞 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO | L1210(小鼠白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Adult bone marrow mesenchymal stem cells | WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
CL-0270CRT(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(彝族);KM934 |
HS-6細(xì)胞，人黑色素瘤細(xì)胞 德氏乳桿菌保加利亞亞種 人母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y | 人胎盤絨毛膜原代細(xì)胞Rhesus antibody Rh IDE 胰島素降解酶抗體 規(guī)格 0.2ml |
BSC-1(猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | PARP1 Others Mouse 小鼠 PARP-1 / PARP 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Y3-Ag 1.2.3大鼠骨髓瘤細(xì)胞 Myeloma cells in Y3-Ag 1.2.3 rats DMEM培養(yǎng)基+10%FBS | 人中腦星形膠質(zhì)細(xì)胞HA-mb |
KM小鼠子瘤株;U14 | Rhesus antibody Rh sIgA/PE PE標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格 0.1ml |
LHRH(Mouse Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 小鼠黃體生成素釋放激素 96T | 人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Human |
PP-1 蛋酸酯酶-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | ET-1(Human Endothelin 1) ELISA Kit 人內(nèi)皮素1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
phospho-MEK1 (Thr386)： 0酸化原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml | 769-P(人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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