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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人外周血白采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人外周血白經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人外周血白原代細胞 | 組織來源 | 外周血 |
英文名稱 | Human Peripheral Blood Leukocyte Cells | 貨號 | YS-01X7121 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人外周血白細胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細胞（Leukocyte），舊稱白血球，血液中的一類細胞。根據(jù)白細胞的細胞質(zhì)內(nèi)有無特殊顆粒，可將其分為有粒白細胞和無粒白細胞。前者常簡稱為粒細胞，根據(jù)其特殊顆粒的染色特性，又分為粒細胞、嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞，白細胞也通常被稱為免疫細胞。在顯微鏡下可以看到，血細胞中體積比較大、數(shù)量比較少，具有細胞核；其主要作用是吞噬細菌、防御疾病。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
CM-R123大鼠角膜成纖維細胞培養(yǎng)基100mL | AHI1： 白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體 0.2ml |
Anti-HO-2 血紅素氧合酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABCA7 三0酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白7抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-cath-K/CK /FITC 熒光素標記組織蛋白酶K抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IDE 胰島素降解酶抗體 規(guī)格 0.1ml |
IRS-3 胰島素受體底物-3(抗原) 0.5mg | HECTD3： E3連接酶抑制素受體3抗體 0.2ml |
IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM123B/AMER1 腎母細胞瘤X蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細胞 | U251 人膠質(zhì)瘤細胞 |
CL-0426RKO-E6(人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞)5×106cells/瓶×2 | 人星形膠質(zhì)細胞 |
外周血白細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 猴源細胞 |
GPS5 豚鼠皮膚成纖維樣細胞 | COLO 320DM(人結(jié)直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
ERA-2細胞，人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞 人癌阿耐藥細胞株,MCF/Adr細胞 臺盼藍TB | 人外周血白原代細胞Rhesus antibody Rh IDE 胰島素降解酶抗體 規(guī)格 0.1ml |
SGC7901/DDP 人胃癌耐藥株 | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/3/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
RSC96細胞，大鼠雪旺細胞 人肝癌細胞,9204細胞 CL-0136L6(大鼠成肌細胞)5×106cells/瓶×2 | 人小膠質(zhì)細胞HM |
KM小鼠子瘤株;U27 | Rhesus antibody Rh sIgA/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗人IgA 規(guī)格 0.1ml |
GABA ELISA Kit 大鼠γ基 96T | 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-D3 |
CD5 CD5 多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | FSH(Human follicle-stimulating hormone) ELISA Kit 人促卵泡素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MLF1： 髓細胞性白血病蛋白1抗體 0.2ml | MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細胞 |
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