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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人真皮淋巴上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人真皮淋巴上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人真皮淋巴上皮原代細胞 | 組織來源 | 皮膚組織 |
英文名稱 | Human Dermal Lympho Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7330 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人真皮淋巴上皮細胞分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質內。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結構組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質。微血管內皮細胞（MEC）在炎癥反應、腫瘤生長、創(chuàng)面愈合過程中起著非常重要的作用。在創(chuàng)面愈合研究領域，由于表皮細胞、真皮成纖維細胞體外培養(yǎng)技術的成熟，人們對這兩種細胞早已進行了大量深入的研究。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2 | TAFI ELISA Kit 大鼠纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf150： 1號染色體開放閱讀框150抗體 0.2ml | Glycine Receptor alpha 1 + alpha 2： 甘酸受體α1+甘酸受體α2抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh CEBP-alpha 轉錄調節(jié)因子C/EBP α 抗體 規(guī)格 0.1ml | Protamine 2： 2抗體 0.2ml |
Anti-NP/FITC 熒光素標記任基酚抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | FRA2/FOSL2(Fos related/like antigen 2) FOS樣抗原2 0.5mg |
IgM/Gold 金標記小鼠抗兔IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | MMP-1： 基質金屬蛋白酶-1抗體 0.1ml |
TPP1 Others Human 人 TPP1 / CLN2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | CA10 Others Human 人 CA10 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人結直腸腺癌細胞;HCT-15 [HCT15] | TNFSF13 Others Mouse 小鼠 TNFSF13 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/India/NIV33487/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) | USP7 Others Human 重組人 USP7 / HAUSP 蛋白 (His & GST 標簽) |
CD1D Others Human 人 CD1D / R3G1 人細胞裂解液 (陽性對照) | 新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞;NBTF 結腸腺癌細胞，RKO細胞 TA2細胞，小鼠自發(fā)高癌細胞 |
rCSC, 大鼠心肌細胞 | 人真皮淋巴上皮原代細胞Protamine 2： 2抗體 0.2ml |
M14細胞，人黑色素瘤細胞 枯草芽孢桿菌黑色變種 人肺癌細胞;A-427 [A427] | 人角膜細胞HK |
膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL | SPHK1 Others Human 人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
NCI-H157(人非小細胞肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 SRSV/3T3(SRSV轉化的3T3細胞) | Anti-IL-13Ra2/FITC 熒光素標記白細胞介素-13受體a2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-RSK3 (Thr353/356) 0酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | SHG-44細胞，膠質瘤細胞 霉 人淋巴內皮細胞RNAHLEC miRNA5 μg |
Rhesus antibody Rh phospho-PIK3R1(Tyr556) 0酸化0脂酰肌醇激酶抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KIST/UHMK1 絲/蘇蛋白激酶KIST抗體(激酶相互作用與白血病相關基因) 規(guī)格 0.2ml |
STK(Reat serine/threonine protein kinase,STK) ELISA Kit 大鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶 96T | TPP1 Others Human 人 TPP1 / CLN2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
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