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詳細介紹
兔皮膚肥大原代細胞
兔皮膚肥大細胞分離自皮膚組織；皮膚肥大細胞廣泛分布于皮膚微血管周圍，分泌多種細胞因子，參與免疫調(diào)節(jié)（T細胞、B細胞、APC細胞活化）。皮膚肥大細胞表達MHC分子、B7分子，具有APC功能。表達大量的IgE-Fc受體，釋放過敏介質(zhì)。具有弱吞噬功能，和血液的嗜堿粒細胞同樣，具有強嗜堿性顆粒的組織細胞。存在于血液中的這類顆粒，含有肝素、組織胺、5-羥色胺，由細胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質(zhì)，可在組織內(nèi)引起速發(fā)型過敏反應（炎癥）。由于在肥大細胞上結(jié)合的IgE抗體和抗原的接觸，使細胞多陷于崩壞。肥大細胞呈圓形或卵圓形，細胞核小，呈圓形或橢圓形，染色淺，位于細胞中央。細胞常成堆或單個分布于血管附近。細胞呈圓形或卵圓形，細胞質(zhì)中充滿大小一致、染成藍紫色的顆粒，均勻分布在核周圍。
英文名稱 | Rabbit Skin Mast Cells | 組織來源 | 皮膚 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8409 |
細胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔皮膚肥大細胞
組織來源：皮膚
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：懸浮
細胞形態(tài)：圓形
傳代特性：屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔皮膚肥大細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔皮膚肥大采用膠原酶-混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔皮膚肥大經(jīng)CD117免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
人結(jié)直腸腺癌細胞;COLO 205 大鼠腎動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | 酸化細胞分裂周期蛋白16抗體 |
酸化核糖體S6K2蛋白激酶抗體 | 轉(zhuǎn)綠激活蛋白SRCAP抗體 |
腫瘤抑制基因LUCA15抗體 | 酸化皮層肌動蛋白抗體 |
豬源產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌K99抗體 | 酸化細胞分裂周期蛋白16抗體 |
酸化皮層肌動蛋白抗體 | 轉(zhuǎn)綠激活蛋白SRCAP抗體 |
MLA144 MLA144長臂猿淋巴瘤細胞 | CL-0310VE(人血管內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2 |
RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜節(jié)細胞 人單核細胞型淋巴瘤，THP1細胞 GC-2spd(ts)(小鼠精母細胞) | 綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞;MGC803-GFP |
CL-0408NEC(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 團頭魴尾鰭細胞;WCF |
U251人膠質(zhì)瘤細胞 | BEL-7405(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
HepII細胞，猴腎細胞 人白血病阿耐藥株,K562/Adr細胞 人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38] | 兔皮膚肥大原代細胞酸化皮層肌動蛋白抗體 |
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4A | TNFRSF1B Others Human 人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B (aa 1-268, 196 Met/Arg) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Raji細胞，人Butt`s淋巴瘤細胞 C57小鼠黑色素瘤瘤株,ME細胞 人腎近曲小管上皮細胞裂解物HRPTEpiCL | 人髓核細胞HNPC |
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞(亞系);293T/17 | 酸化中心粒蛋白Nudel抗體 |
豬源產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌K99抗體 | SGC-7901, 人胃腺癌細胞系 |
酸化核糖體S6K2蛋白激酶抗體 | 腫瘤抑制基因LUCA15抗體 |
酸化中心粒蛋白Nudel抗體 | MLA144 MLA144長臂猿淋巴瘤細胞 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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