詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975說明
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是1988年7月從一名女性(無抽煙史)非小細(xì)胞肺腺癌組織中分離得到的。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代;每周換液2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:10,13;D16S539:9,12;D18S51:13;D19S433:15,15.2;D21S11:28;D2S1338:17;D3S1358:14,15;D5S818:11,12;D7S820:8;D8S1179:13;FGA:21,24;TH01:7;TPOX:8,11;vWA:18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975說明操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975說明貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975說明懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-URGCP/URG4/FITC 熒光素標(biāo)記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體C端IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CD146/MCAM 黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
瓜氨酸環(huán)肽抗體 Anti-CCP 0.1ml
Synaptogyrin 2 英文名稱: 神經(jīng)細(xì)胞囊泡循環(huán)蛋白2抗體 0.2ml
E4F1 英文名稱: E4F轉(zhuǎn)錄因子1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Histone H1.4(Ser27) 磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
CD146/MCAM 黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TRANCE(Human TNF related activation induced cytokine) ELISA Kit 人壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GABA 兔抗γ1氨基丁酸抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgM 小鼠抗人IgM 規(guī)格 1mg
PG(Human peptidoglycan) ELISA Kit 人肽聚糖 96T
Senataxin 英文名稱: 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
CD62L 英文名稱: L選擇素抗體 0.1ml
Anti-GABA 兔抗γ1氨基丁酸抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ELISA Kit for Human Vimentin大鼠表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白D(SPD)ELISA試劑盒,英文名:SPD ELISA KiISA Kit for Human Sarcosine dehydrogenase, mitochondrial大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒,英文名:IGFBP2 ELISA KiISA Kit for Human Mitochondrial carnitine/acylcarnitine carrier protein大鼠雙氧化酶2(DUOX2)ELISA試劑盒,英文名:DUOX2 ELISA KiISA Kit for Tetrahydrobiopterin大鼠連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)ELISA試劑盒,英文名:CTNNβ1 ELISA KiISA Kit for Human Prosalusin大鼠谷氨酰胺合成酶(GS)ELISA試劑盒,英文名:GS ELISA KiISA Kit for Human Visinin-like protein 1大鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA試劑盒,英文名:PK ELISA Kit大鼠BH3相互作用域死亡激動劑(Bid)ELISA試劑盒,英文名:Bid ELISA Kit
大鼠AMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1)ELISA試劑盒,英文名:PRKAβ1 ELISA KiISA Kit for Human Androgen-dependent TPF1-regulating protein小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒,英文名:TRAIL-R1 ELISA KiISA Kit for Human Apolipoprotein A-IV小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒,英文名:PAP ELISA KiISA Kit for Human Alpha-hemoglobin-stabilizing protein小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒,英文名:GIP ELISA KiISA Kit for Calcitriol小鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒,英文名:Des ELISA KiISA Kit for Human Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog B, mitochondrial小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒,英文名:AIF ELISA KiISA Kit for Human Cartilage oligomeric matrix protein小鼠β干擾素(IFNβ)ELISA試劑盒,英文名:IFNβ ELISA Kit
多聚賴酸溶液0.01%(Poly-L-Lysine) 10ml 無菌,細(xì)胞培養(yǎng)用
VIP 英文名稱: 血管活性腸肽抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-BLNK(Tyr84) 磷酸化T淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
MT(metallothionein) 金屬硫蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DORFIN 英文名稱: 環(huán)指蛋白19抗體 0.2ml
Anti-beta-Amyloid(31-35) β淀粉樣肽(31-35)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975培養(yǎng)FFA(Mouse free fatty acids) ELISA Kit 小鼠游離脂肪酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CDK3 /FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
ACTH ELISA Kit 魚促腎上腺皮質(zhì)激素 96T
MAML2 英文名稱: 主導(dǎo)控制樣蛋白2抗體 0.2ml
phospho-AMPK beta 1 (Ser108) 英文名稱: 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體 0.1ml
Anti-CDK3 /FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml