細胞名稱  人胚胎皮膚成纖維細胞；HES培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細胞樣　

品牌 貼壁生長

特征特性 該細胞系來源于一男性胚胎的皮膚組織。2005年由*昆明細胞庫建立。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS  

傳代方法 1：

2傳代；3-4天一次  

傳代情況 P3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 熒光法（-）　

STR -

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
人胚胎皮膚成纖維細胞；HES培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
人胚胎皮膚成纖維細胞；HES培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
人胚胎皮膚成纖維細胞；HES培養(yǎng)懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
BP(Human Bullous Pemphigoid) ELISA Kit 人大皰性類天皰瘡抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) 磷酸化蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh LDHC/Cancer,testis antigen 32 乳酸脫氫酶LDH-C(/抗原32)抗體 規(guī)格 0.1ml

ET-1(Human Endothelin 1) ELISA Kit 人內(nèi)皮素1 96T

CAF1p55 英文名稱： 染色質(zhì)組裝因子1P55抗體 0.2ml

CD8B 英文名稱： CD8β鏈(CD8-β)抗體 0.1ml

Anti-Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) 磷酸化蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
VEGF(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor) ELISA KIT 人血管內(nèi)皮細胞生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Ghrelin 腦腸肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Goat IgG/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格 0.3ml

Hsp-60(Human Heat Shock Protein 60) ELISA Kit 人熱休克蛋白60 96T

RAMP2 英文名稱： 受體活性修飾蛋白2抗體 0.1ml

phospho-CTNNBIP1 (Thr43+Ser50) 英文名稱： 磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體 0.1ml

Anti-Ghrelin 腦腸肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠催產(chǎn)素受體(OXTR)ELISA試劑盒，英文名：OXTR ELISA KiISA Kit for Human Next to BRCA1 gene 1 protein大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體(sTRAIL)ELISA試劑盒，英文名：sTRAIL ELISA Kit人神經(jīng)細胞生長抑制因子(Necdin)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠激動異構(gòu)酶/細胞分裂素MB(CKMB)ELISA試劑盒，英文名：CKMB ELISA KiISA Kit for Human PC4 and SFRS1-interacting protein大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒，英文名：GAD-Ab ELISA Kit人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶1(PIN1)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠單胺氧化酶(MAO)ELISA試劑盒，英文名：MAO ELISA KiISA Kit for Human Perilipin-1大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒，英文名：IL-1sRⅡ ELISA KiISA Kit for Human Prokineticin-1大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒，英文名：ⅠCTP ELISA Kit

大鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA試劑盒，英文名：Slit2 ELISA KiISA Kit for Human Mammaglobin-A大鼠胰島素樣生長因子2(IGF2)ELISA試劑盒，英文名：IGF2 ELISA KiISA Kit for Human Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 3大鼠雙腎上腺皮質(zhì)激素(DCX)ELISA試劑盒，英文名：DCX ELISA KiISA Kit for Triglyceride大鼠粒細胞巨噬細胞集落激因子(GMCSF)ELISA試劑盒，英文名：GMCSF ELISA KiISA Kit for Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 12大鼠谷氨酸脫氫酶(GDH)ELISA試劑盒，英文名：GDH ELISA KiISA Kit for Human Pantetheinase大鼠別孕烯醇酮(AP)ELISA試劑盒，英文名：AP ELISA Kit大鼠Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)ELISA試劑盒，英文名：BNIP3 ELISA Kit
兔抗雞IgG純化抗體 1mg/10mg 國產(chǎn)

YY1AP1 英文名稱： 肝癌相關(guān)蛋白2抗體(轉(zhuǎn)錄因子YY1結(jié)合蛋白1抗體) 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CPI17 alpha (Thr38) 磷酸化蛋白磷酸激酶PKC/CPI-17抗體 規(guī)格 0.1ml

Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人α亞基人絨毛膜促性腺激素抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DCHS1 英文名稱： 原鈣粘蛋白16抗體 0.2ml

Anti-14-3-3 family protein 蘋果14-3-3蛋白抗體(植物)Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
人胚胎皮膚成纖維細胞；HES培養(yǎng)Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物酶標記鼠抗人壞死因子-α單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

PLGF (Placenta growth factor) 胎盤生長因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

腱糖蛋白-C抗體 anti-Tn-C 0.2ml

5HT1E Receptor 英文名稱： 5-羥色胺受體1E抗體 0.2ml

EMR1 英文名稱： 表皮生長因子樣激素受體1 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-JunB (Thr102/Thr104) 磷酸化活化蛋白激酶B抗體 規(guī)格 0.2ml

PLGF (Placenta growth factor) 胎盤生長因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg