詳細介紹
人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293Ad5價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293Ad5價格
形態(tài)特性 上皮樣;多角
品牌 貼壁生長
特征特性 293細胞是由腺病毒5型(Ad5)DNA轉(zhuǎn)化原代人胚腎獲得的細胞系。該細胞對人的腺病毒尤其敏感,能受納高水平的腺病毒DNA。含有5型腺病毒的基因,且能高效表達。此外,293細胞的染色體數(shù)目以亞三倍體(hypotriploid)占多數(shù),主流數(shù)為64條(30%),高倍體為4.2%。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C35
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293Ad5價格貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293Ad5價格操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
NOS (Rabbit nitric oxide synthase) ELISA Kit 兔一氧化氮合成酶Multi-class antibodies規(guī)格: 96T
Anti-Cytochrome C/FITC 熒光素標記細胞色素 C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Cytochrome P450 2B6 細胞色素P450 2B6抗體 規(guī)格 0.2ml
Anthrax 炭疽沉淀素血清(馬來源) 1ml
Ceramide synthase 1 英文名稱: 長壽相關(guān)基因lASS1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ZNF268 鋅指脂蛋白-1c抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-Cytochrome C/FITC 熒光素標記細胞色素 C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VB6(Human Vitamin B6) ELISA Kit 人維生素B6Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Plexin A1 神經(jīng)叢蛋白A1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Hexokinase 3 己糖激酶3抗體 規(guī)格 0.2ml
FN(Human Fibronectin) ELISA Kit 人纖連蛋白 96T
PET112L 英文名稱: 細胞色素氧化酶裝配因子PET112抗體 0.2ml
C9orf25 英文名稱: 9號染色體開放閱讀框25抗體 0.2ml
Anti-Plexin A1 神經(jīng)叢蛋白A1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1(PPRC1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠成纖維細胞生長因子2(FGF2/bFGF)ELISA試劑盒,英文名:FGF2/bFGF ELISA KiISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 18小鼠血栓素A2(TXA2)ELISA試劑盒,英文名:TXA2 ELISA KiISA Kit for Human Asporin小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG1)ELISA試劑盒,英文名:NRG1 ELISA KiISA Kit for Human Apoptosis regulator Bcl-2小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒,英文名:ACA ELISA KiISA Kit for Human Protein C9orf140小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒,英文名:OFQ/N ELISA KiISA Kit for Human Cadherin-2小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒,英文名:IL-2 ELISA KiISA Kit for Human Caspase-9小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒,英文名:PⅠCP ELISA Kit
人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒,英文名:SP-R ELISA KiISA Kit for Human DRADA小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)ELISA試劑盒,英文名:TGFβ3 ELISA KiISA Kit for Human Endothelial PAS domain-containing protein 1小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)ELISA試劑盒,英文名:PAI1 ELISA KiISA Kit for Human Fatty acid-binding protein, heart小鼠乳酸脫氫酶B(LDHB)ELISA試劑盒,英文名:LDHB ELISA KiISA Kit for Human Vitamin D-binding protein小鼠聚集蛋白聚糖(AGC)ELISA試劑盒,英文名:AGC ELISA KiISA Kit for Human Beta-hexosaminidase subunit beta小鼠干擾素γ(IFNγ)ELISA試劑盒,英文名:IFNγ ELISA KiISA Kit for Human Interferon alpha-14小鼠表皮生長因子受體2(EGFR2)ELISA試劑盒,英文名:EGFR2 ELISA Kit
鼠兔通用SABC(HRP)試劑盒 200片 Vector分裝
USF-1 英文名稱: 等上游刺激因子1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATG3 (Tyr18) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格 0.1ml
NPY1R (neuropeptide Y1 receptor) 神經(jīng)肽Y1受體抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DHH 英文名稱: DHH蛋白抗體 0.2ml
Anti-AR 雄激素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293Ad5價格BJP(Human Bence-Jones protein) ELISA Kit 人本周蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-HHV8/ORF50 人類皰疹病毒8抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MFSD2A 促進調(diào)解蛋白家族2A抗體 規(guī)格 0.2ml
5-LO/LOX(Human 5-lipoxygenase) ELISA Kit 人5脂加氧酶 96T
RFESD 英文名稱: RFESD蛋白抗體 0.2ml
C5ORF42 英文名稱: 5號染色體開放閱讀框42抗體 0.2ml
Anti-HHV8/ORF50 人類皰疹病毒8抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml