詳細(xì)介紹
人乳腺癌細(xì)胞;MDA-MB-453價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人乳腺癌細(xì)胞;MDA-MB-453價格
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系由Cailleau R在1976年從一名48歲的患有轉(zhuǎn)移性乳腺癌的白人女性的心包滲出液中分離建立的。該細(xì)胞表達FGF的受體。
培養(yǎng)條件 L15:
Leibovitz Medium 10%FBS
傳代方法 1:2~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:12;D16S539:9;D18S51:15,20;D19S433:13,14;D21S11:29,31;D2S1338:23,24;D3S1358:15,OL;D5S818:11;D7S820:10;D8S1179:10,12;FGA:18,23;TH01:6;TPOX:10;vWA:17,18;
同工酶
染色體 72~90
使用權(quán)限 A類
人乳腺癌細(xì)胞;MDA-MB-453價格貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
人乳腺癌細(xì)胞;MDA-MB-453價格操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Cephalosporium gramineum麥類條斑病菌PCR試劑盒
Cephalosporium maydis玉米晚枯病菌PCR試劑盒
Cephalosporium sacchari甘蔗凋萎病菌PCR試劑盒
Ceratitis capitata地中海實蠅PCR試劑盒
Ceratocystis fagacearum櫟枯萎病菌PCR試劑盒
Ceratocystis ulmi榆枯萎病菌PCR試劑盒
Chalara fraxinea白蠟鞘孢菌PCR試劑盒
Cherry Leafroll Virus(CLRV)櫻桃葉卷曲病毒RT-PCR試劑盒
Chilli Veinal Mottle Virus(ChiVMV)辣椒葉脈斑駁病毒RT-PCR試劑盒
Chrysanthemum Virus B(CVB)菊花病毒B型PCR試劑盒
Chrysomyxa arctostaphyli云杉帚銹病菌PCR試劑盒
Ciborinia camelliae Kohn山茶花腐病菌PCR試劑盒
Citrus Tristeza Virus(CTV)柑橘衰退病毒RT-PCR試劑盒
Cladosporium cucumerinum黃瓜黑星病菌PCR試劑盒
Clavibacter michiganensis ssp. insidiosus苜蓿細(xì)菌性萎蔫病菌PCR試劑盒
Clavibacter michiganensis ssp. michiganensis番茄潰瘍病菌PCR試劑盒
Clavibacter michiganensis ssp. nebraskensis玉米內(nèi)州萎蔫病菌PCR試劑盒
Clavibacter michiganensis ssp. sepedonicus馬鈴薯環(huán)腐病菌PCR試劑盒
Clavibacter tritici小麥蜜穗病菌PCR試劑盒
Clavicacter michiganensis ssp.michiganensis番茄細(xì)菌性潰瘍病菌PCR試劑盒
Clobodera rostochiensis馬薯金線蟲PCR試劑盒PCR試劑盒
Coconut Cadang-Cadang Viroid(CCCVd)椰子死亡類病毒RT-PCR試劑盒
Coconut lethal yellowing phytoplasma椰子致死黃化植原體PCR試劑盒
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