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豬ELISA試劑盒常見的售后問題
閱讀:339 發(fā)布時(shí)間:2018-7-20豬ELISA試劑盒常見的售后問題
1.用100ul 70%酒精孵育PVDF孔板,室溫下孵育10分鐘。
2.倒去酒精,用100ul PBS洗滌3次。
3.將100ul捕獲抗體加入10ml PBS中,混合,每孔加100ul,蓋上板蓋。
4. 倒去液體,100ul PBS洗滌一次。
5.每孔加入100ul 2%脫脂乳PBS(見試劑準(zhǔn)備),蓋上板蓋,室溫下孵育2小時(shí)。
6.在水槽邊和吸水紙上輕去液體。
7.用100ul PBS洗滌一次。
8.每孔加入100ul細(xì)胞懸浮液(含適當(dāng)量的細(xì)胞和相應(yīng)濃度的刺激劑)。細(xì)胞可預(yù)先在體外接受刺激(間接Eli-spot)。蓋上標(biāo)準(zhǔn)的 96孔板塑料板蓋,37℃ CO2孵育箱中孵育一定的時(shí)間(15-20小時(shí))。這期間不要晃動或移動孔板。
9.在水槽邊和吸水紙上輕去液體。
10.每孔加100ul洗滌緩沖液,4℃孵育10分鐘。
11.用100ul洗滌緩沖液洗孔3次。
12.于10ml PBS-1%BSA中稀釋100ul檢測抗體,此為一板的量。每孔加100ul此液體,蓋上板蓋,37℃下孵育1小時(shí)30 分。
13.倒去液體,用100ul洗滌緩沖液洗3次。
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