人ELISA試劑盒原理：

    采用競爭法測定金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL水平。用金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL抗原包被微孔板，制成固相載體，實驗時依次在微孔板中加入標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)品，并加入HRP標(biāo)記的OXLDL抗體，標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)品中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與固相抗原結(jié)合。反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍色，再用硫酸終止反應(yīng)，轉(zhuǎn)變成黃色。標(biāo)本中抗體量越多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少，顏色越淺。顏色的深淺和樣品中的OXLDL含量呈負(fù)相關(guān)。采用酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度（OD值），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算測試樣品中OXLDL濃度。

人ELISA試劑盒操作程序：

    1. 棄去液體，甩干，每孔加滿稀釋后洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。如此重復(fù)5次，拍干。

    2. 每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。。

    3. 取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

    4.測定：以空白孔調(diào)零，在450nm波長下測量各孔的吸光度值（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

    5.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了的，其實際濃度應(yīng)該乘以總稀釋倍數(shù)。

人ELISA試劑盒技術(shù)特點：

1準(zhǔn)確可靠，臨床雙盲對照試驗＞1000例，結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對，結(jié)果*性大于99%。

2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。

3快速：整個檢測流程只需3小時。

4簡便：試劑盒提供預(yù)混好的試劑，使體系配置操作簡便。

5防污染

6高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補鏈結(jié)合必需*配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對，在延伸中產(chǎn)生熒光。