小鼠ELISA試劑盒操作步驟：

1． 確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。

2． 將倍比稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品各0.1ml依次參與一排7孔中，1孔只加樣品稀釋液的作為對(duì)照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔參與。

3． 酶標(biāo)板加上蓋，37℃反應(yīng)90分鐘。

4． 反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體；或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體，再對(duì)著吸水紙拍幾下。洗刷2次。

5． 將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml依次參與。37℃反應(yīng)60分鐘。

6． 0.01M TBS或0.01M PBS洗刷3次，每次浸泡1分鐘左右。

7． 將準(zhǔn)備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次參與。37℃反應(yīng)30分鐘。

8． 0.01M TBS或0.01M PBS洗刷5次，每次浸泡1-2分鐘左右。

9． 按每孔0.1ml依次參與TMB顯色工作液，37℃避光反應(yīng)，反應(yīng)過(guò)程中，ELISA試劑盒要常常的調(diào)查，當(dāng)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔不同不明顯時(shí)，即可參與TMB終止液0.1ml/孔。（顯色反應(yīng)長(zhǎng)不要超越30分鐘）。

10． 用酶標(biāo)儀在450nm測(cè)定O.D.值。

11． 依據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對(duì)應(yīng)的濃度。用戶也能夠運(yùn)用各種應(yīng)用軟件來(lái)核算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍，其實(shí)踐濃度應(yīng)該×N。

小鼠ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

1.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)需戴手套、穿工作衣，嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度，各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

2.終止液具有腐蝕性，應(yīng)避免接觸皮膚和衣物，如不慎接觸請(qǐng)立即用大量自來(lái)水沖洗。

3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開(kāi)袋，未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。

4.濃縮洗滌液在低溫時(shí)容易結(jié)晶，使用時(shí)需恢復(fù)至室溫以*溶解。

5.洗滌時(shí)各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。

6.用于檢測(cè)的樣品應(yīng)保持新鮮。

7.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

8.不同批號(hào)試劑組分不得混用。