熒光-PCR法原理:

所謂實時熒光-PCR法技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

熒光-PCR法技術步驟:

將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性，低溫復性，適溫延伸的熱循環(huán)，并遵守聚合酶鏈反應規(guī)律，與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離于反應體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，被擴增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長，通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度，求得Ct值，同時利用數(shù)個已知模板濃度的標準品作對照，即可得出待測標本目的基因的拷貝數(shù)。

熒光-PCR法服務流程:

1.客戶認真寫好訂單，提供待檢基因相關信息;

2.簽訂技術服務合同，支付預付款(30-50%);

3.設計合成定量PCR引物(或客戶提供文獻引物委托本公司合成);

4.DNA/RNA的抽提、定量、RNA反轉錄;

5.PCR預實驗，主要檢測引物的特異性和擴增效率;

6.正式定量實驗:對所有樣品上機檢測;

7.實驗結果和數(shù)據(jù)分析，形成報告。