熒光-PCR法原理:

所謂實時熒光-PCR法技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

熒光-PCR法技術(shù)步驟:

將標(biāo)記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性，低溫復(fù)性，適溫延伸的熱循環(huán)，并遵守聚合酶鏈反應(yīng)規(guī)律，與模板DNA互補(bǔ)配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離于反應(yīng)體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，被擴(kuò)增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長，通過實時檢測與之對應(yīng)的隨擴(kuò)增而變化熒光信號強(qiáng)度，求得Ct值，同時利用數(shù)個已知模板濃度的標(biāo)準(zhǔn)品作對照，即可得出待測標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)。

熒光-PCR法服務(wù)流程:

1.客戶認(rèn)真寫好訂單，提供待檢基因相關(guān)信息;

2.簽訂技術(shù)服務(wù)合同，支付預(yù)付款(30-50%);

3.設(shè)計合成定量PCR引物(或客戶提供文獻(xiàn)引物委托本公司合成);

4.DNA/RNA的抽提、定量、RNA反轉(zhuǎn)錄;

5.PCR預(yù)實驗，主要檢測引物的特異性和擴(kuò)增效率;

6.正式定量實驗:對所有樣品上機(jī)檢測;

7.實驗結(jié)果和數(shù)據(jù)分析，形成報告。