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貼壁細胞與懸浮細胞的培養(yǎng)有有哪些方面區(qū)別
閱讀:380 發(fā)布時間:2024-5-27貼壁細胞:
概念:貼壁細胞是指那些在體外培養(yǎng)時需要附著在固體表面(如玻璃、塑料)上才能生長和分裂的細胞。這類細胞在自然狀態(tài)下,通常存在于實體組織中,如皮膚、肌肉、器官等。
形態(tài)特征:貼壁細胞通常會附著在培養(yǎng)瓶底部,可能會形成緊密的細胞間連接,如緊密形成單層或多層的細胞層。它們的形狀多樣,可以是扁平的,長方形的,或者是多邊形的等。貼壁細胞通常會有明顯的核和細胞質,細胞質內可見各種細胞器。細胞之間連接、間隙連接等。
生長特性:貼壁細胞的生長通常需要一定的時間,因為它們需要先附著在培養(yǎng)瓶底部,然后才能開始分裂。當細胞達到一定的密度時,它們的生長速度通常會減慢,這被稱為接觸抑制。貼壁細胞的生長和分裂通常需要豐富的營養(yǎng)和氧氣供立。
懸浮細胞:
概念:懸浮細胞則是指在體外培養(yǎng)時可以直接在培養(yǎng)液中自由生長和分裂,無需附著在固體表面上的細胞。這類細胞在自然狀態(tài)下,通常存在于液體組織中,如血液和淋巴等。
形態(tài)特征:懸浮細胞在培養(yǎng)液中呈現(xiàn)為單個的、自由浮動的狀態(tài),不會附著在培養(yǎng)瓶底部。它們的形狀通常是圓形或圓形,大小比較一致。懸浮細胞的核和細胞質也很明顯,但因為它們的大小通常較小,所以細胞器可能不如貼壁細胞明顯。懸浮細胞之間通常沒有緊密的細胞間連接。
生長特性:懸浮細胞的生長和分裂通常比貼壁細胞快,因為它們不需要先附著在培養(yǎng)瓶底部。懸浮細胞的生長通常不受接觸抑制的影響,即使細胞密度增加,它們也可以繼續(xù)生長和分裂。
這兩種細胞類型在實驗操作和細胞培養(yǎng)技術上有所不同。
一、貼壁生長的細胞核懸浮生長的細胞都有很多種
活體體內的細胞當離體置于體外培養(yǎng)時大多數(shù)均以貼壁方式生長,主要包括正常細胞和腫瘤細胞,比如成纖維細胞,骨骼組織(骨及軟骨),心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺皮膚神經(jīng)膠質細胞,內分泌細胞,黑色素細胞及各種腫瘤細胞等。
少數(shù)細胞在體外培養(yǎng)是懸浮生長,包括一些取自血、脾或骨髓的培養(yǎng)細胞,尤其是血液白細胞以及癌腫細胞。
二、貼壁細胞與懸浮細胞在培養(yǎng)條件上的區(qū)別
貼壁細胞要加血清,不貼壁的可以不加血清。
三、貼壁細胞與懸浮細胞在培養(yǎng)方式上的區(qū)別
不貼壁的一般用各種搖瓶和反應器培養(yǎng),貼壁的一般用方瓶或孔板培養(yǎng),使用微載體時也可以用反應器培養(yǎng)。
四、貼壁細胞和懸浮細胞在傳代方法上的不同
由于貼壁細胞貼壁生長,接觸抑制,長滿一瓶后貼壁較緊,不易取出。這時必須用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶處理,使其分散開后取出,然后在放入新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
懸浮細胞其實也有貼壁現(xiàn)象,只是貼壁不牢??梢灾苯佑么荡虬l(fā)是細胞掉落下來,進行傳代。
五、貼壁細胞與懸浮細胞在顯微鏡下的區(qū)別
貼壁細胞分為兩種,上皮細胞型和成纖維細胞型,在顯微鏡下觀察時,貼壁細胞在瓶底伸展并延伸成梭型或不規(guī)則的三角形或扇形,而且晃動培養(yǎng)液時,細胞不動。
懸浮細胞漂在培養(yǎng)液中,呈圓形,晃動培養(yǎng)液時細胞也隨著漂動。