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人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒樣品操作及注意事項

閱讀:109          發(fā)布時間:2019-5-31
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                 人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒樣品操作及注意事項
 

樣品收集、處理及保存方法

1、 血  清-----操作過程中避免任何細胞刺激,使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2、 血  漿----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細胞上清液--1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿---將組織加入適量生理鹽水搗碎,1000×g離心10分鐘,取上清液。

5、 保  存----如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-80 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾,不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 
操作注意事項

1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀釋過后的標準品應丟棄,不可保存。

2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

3. 不用的其它試劑,應包裝好或蓋好,不同批號的試劑不要混用,保質前使用。

4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7. 底物A易揮發(fā),避免長時間打開蓋子,底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒,實驗完成后應立即讀取OD值。

8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

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