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活細(xì)胞/膜損傷細(xì)胞雙染試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-20 13:06:05瀏覽次數(shù):269

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500T|1000T
貨號 FS-X9701 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
活細(xì)胞/膜損傷細(xì)胞雙染試劑盒公司*的商品:味覺感受器蛋白T2R38抗體卡鉑 CARBOPLATIN(RG)Human
5色羥化2抗體卡鉑 CARBOPLATIN(RG)Human, Mouse, Rat
硫氧還蛋白11抗體CARBOLINE-1-PROPIONIC ACID, B-(SH)Human
微管蛋白4α抗體CARBOLINE-1-PROPIONIC ACID, B-(SH)Huma

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬于:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

活細(xì)胞/膜損傷細(xì)胞雙染試劑盒


500T|1000T

1~3天

商品介紹:

正常細(xì)胞/膜損傷細(xì)胞染色試劑盒是采用Calcein-AM/7-AAD 雙染細(xì)胞的方法染色活細(xì)胞和膜損傷細(xì)胞(死細(xì)胞)。

Calcein-AM 是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑,Calcein-AM 由于在Calcein的基礎(chǔ)上加強(qiáng)了疏水性,因此能夠輕易穿透活細(xì)胞膜。當(dāng)其進(jìn)入到細(xì)胞質(zhì)后,酯酶會將其水解為Calcein 留在細(xì)胞內(nèi),發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate)相比,Calcein-AM 是適合作為熒光探針去染活細(xì)胞的,因?yàn)樗募?xì)胞毒性很低。Calcein的激發(fā)和發(fā)射波長分別為490 nm和515 nm。Calcein -AM僅對活細(xì)胞染色。

7-AAD 是一種非滲透性熒光染料,作為核染色染料的7-AAD 不能穿過正常活細(xì)胞的細(xì)胞膜,但可穿透膜損傷細(xì)胞如晚期凋亡細(xì)胞或者壞死細(xì)胞的細(xì)胞膜,它穿過死細(xì)胞膜的無序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核,并嵌入細(xì)胞的DNA 上,形成具有高熒光性的加成物,從而產(chǎn)生紅色熒光(激發(fā):488,545nm,發(fā)射:647 nm),因此7-AAD僅對膜損傷的死細(xì)胞染色??梢杂脕頇z測膜損傷的無活性的細(xì)胞。

由于Calcein和7-AAD-DNA都可被490 nm激發(fā),因此可用熒光顯微鏡同時(shí)觀察活細(xì)胞和膜損傷細(xì)胞。用545 nm 激發(fā),僅可觀察到膜損傷細(xì)胞。

儲存條件:染料-20℃避光保存;避免反復(fù)凍融;稀釋液2-8℃保存。

有效期:六個(gè)月
培養(yǎng)操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

17b-hydroxyandrost-4-ene-3-...英文名稱: OxaliplatinCD163蛋白樣1抗體包裝1mg

17α-Methyltestosterone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxiconazole Nitrate周期依賴性激5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體包裝1g

1,3-(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxytetracycline HCl22號染色體開放閱讀框31抗體包裝250mg

1,6-二氫-2-基-6-氧代-(3,4’-二吡啶)...英文名稱: Oxytetracycline HCl分裂周期37樣蛋白1抗體包裝1g

2,3,4-三氧基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxytocin Acetate羧肽X(M14家族1)抗體包裝250mg

2,3,4-三氧基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Paclitaxel卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體包裝100g

2,3,4-三氧基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Paclitaxel跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體包裝25g

2,3-丁二酮(標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))英文名稱: Palonosetron HCl分子伴侶CESK1蛋白抗體包裝500g

2,3-二氫-6-基咪唑【2,1-b】噻唑鹽鹽(鹽...英文名稱: Paromomycin Sulfate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白124抗體包裝5g

2,6-二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Paromomycin SulfateCDK5激活結(jié)合蛋白1抗體包裝100g

2,6-二基酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pazufloxacin Mesilate磷化表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體包裝25g

2-(4-異丁?;?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pazufloxacin Mesilate腫瘤/抗原1B/1A包裝25g

2-基-4-酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pefloxacin mesylate dihydrate磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝5g

2-乙酰(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pefloxacin mesylate dihydrate跨膜蛋白12抗體包裝1g

2-單硝異山梨酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pemetrexed Disodium免疫球蛋白超家族成員16抗體包裝250mg

紅曲霉(斜面)Monascus anka 質(zhì)量規(guī)格:>95%血小板相關(guān)免疫球蛋白試劑盒亞麻木酚;Secoisolaricir

白鮑魚菇Pleurotus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥595 µg/mg,BR血小板相關(guān)抗體IgM試劑盒氧化苦參堿;Ammothamnine

亮葉耳環(huán)根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測定血小板生成自身抗體試劑盒野苷;Scularin
活細(xì)胞/膜損傷細(xì)胞雙染試劑盒氧化鐠(Ⅲ,Ⅳ)

其他 十一化六鐠

英文名稱: Praseodymium(Ⅲ,Ⅳ) oxide

產(chǎn)品規(guī)格: 3N

包  裝: 5克/25克/100克/500克

CAS號:12037-29-5

Pr6O11=1021.44

級別:3N

含量:≥99.9%

性狀:無定形粉末。不溶于水,易溶于無機(jī),生成相應(yīng)的鹽類,導(dǎo)電性良好,在600°C時(shí)的導(dǎo)電性是Pr2O3的一千萬倍

用途:生化研究。用作陶瓷釉,鐠黃顏料和稀土永磁合金的原料

保存:RT

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 


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