詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Skp2 Inhibitor C1 | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
Skp2Inhibitor C1(SKPin C1)是特異的Skp2介導的p27降解抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:432001-69-9 別名:SKPin C1 純度:98.80% 分子量:465.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
傘狀霉屬Aneurinibacillus sp.大鼠(trypsin)ELISA試劑盒
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胡椒枯萎病Aneurinibacillus sp.大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒
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多根硬皮馬勃Bacillus sp.大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒
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異常漢遜酵母Bacillus sp.大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒
孔狀短小莖點霉Bacillus sp.大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
蠟狀芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
巨型艾美耳球蟲Bacillus sp.大鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒
腫瘤壞死因子誘導蛋白8樣蛋白2/TNFα-IP8L2抗體產(chǎn)堿桿菌德干鏈霉菌
血小板生成受體抗體維氣單胞菌東方擬無枝菌
微管蛋白4α抗體希瓦菌冬蟲夏草屬
脫中胚蛋白抗體中華根瘤菌放線多孢菌屬菌種
p27降解抑制劑(Skp2 Inhibitor C1)N-乙烯基吡咯烷
其他 1-乙烯基-2-吡咯烷;N-乙烯基-2-吡咯烷;1-乙烯基-2-吡啶烷;N-乙烯基吡啶烷;乙烯基吡咯烷;正乙基-2-呲
英文名稱: NVP
其他英文名稱: N-Vinyl-2-pyrrolidone;-Vinyl-2-pyrrolidone;N-Vinylbutyrolactam
產(chǎn)品規(guī)格: AR,99%
包 裝: 100毫升/500毫升/2.5升
CAS號:88-12-0
C6H9NO=111.14
級別:AR
含量:≥99%(GC)
相對密度:1.044~1.047
折光率:1.512~1.515
水分:≤0.05%
性狀:常溫下是一種無色或淡黃色略有氣味的透明液體,易溶于水和其它多種有機溶劑,化學性質(zhì)活潑易水解和聚合。對光敏感。沸點:92-95℃/11mmHg;閃點:95℃。含 氫氧化鈉或水做抑制劑
用途:生化研究。在化妝品、洗滌品、感光材料等諸領域有廣泛的應用
保存:RT,避光