詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
100ml | 1~3天 |
商品介紹:
用途: 用于紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 注意事項(xiàng): 由檸檬酸鈉,等組成。 |
儲存條件:室溫,12個(gè)月
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
熊果;烏蘇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Pipecolic acid HDHD2B蛋白抗體包裝5g
繡線菊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Norvaline造血干特異性相關(guān)結(jié)合蛋白1抗體包裝10MG
溴東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-tert-LeucineI類組織相容性H-2抗原D-Dalpha鏈抗體包裝1g
徐長卿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-TheanineHEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白5A蛋白抗體包裝5g
續(xù)斷(川續(xù)斷)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Theanine熱休克蛋白70抗體包裝1g
續(xù)斷苷A英文名稱: D-Glucuronic acid羥類固脫氫17β抗體(17β-HSD8)包裝5g
續(xù)斷苷B英文名稱: L(+)-allo-Threonine透明質(zhì)結(jié)合蛋白4抗體包裝250mg
玄參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lysine acetateA型流感病H5N1凝集抗體包裝100ml
旋覆花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Cystine dimethyl ester dihydrochlorideA型流感病核衣殼蛋白抗體包裝100g
雪膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: GSK-2636771A型流感病核衣殼蛋白抗體包裝500g
雪膽乙英文名稱: N-Cbz-L-threonine Benzyl EsterA型流感病核衣殼蛋白抗體包裝1g
雪上一支蒿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (+)-2-Methyl-L-serineB型流感病蛋白抗體包裝5g
雪上一枝蒿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3,3-Diphenyl-L-alanine人類狀瘤病16-E7抗體包裝100g
血根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: α-Methyl-L-phenylalanine跨膜蛋白絲1抗體包裝25g
血竭(麒麟竭)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Aspartic acid dimethyl ester hydrochloride肺癌癌基因蛋白3抗體包裝5g
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%落葉型天皰瘡抗體試劑盒1-咖啡??鼘?1-Caffeoylq
舟形毛殼Chaetomium│cymbiforme 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%,BR,可用于培養(yǎng)絡(luò)試劑盒康普瑞汀磷二鈉;Combretasta
酵母屬Saccharomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%;ATP競爭性PI3K和mTOR抑制劑輪狀病抗原試劑盒康普瑞汀;Combretastatin
紅細(xì)胞稀釋液(計(jì)數(shù)液)天青I
其他天青B;亞甲天青;蔚藍(lán)I ;亞甲基天青;氮雜脲I;3-二甲基基-7-甲基基吩噻嗪-5-翁氯化物;天藍(lán)色B
英文名稱:Azure B
其他英文名稱:Azure I;C.I. 52010;3-Methylamino-7-dimethylaminophenothiazin-5-ium chloride
產(chǎn)品規(guī)格:BS
包裝:25克
產(chǎn)品規(guī)格:高純,70%
包裝:25克
CAS號:531-55-5
C15H16ClN3S=305.83
級別:BS
生物染色試驗(yàn):合格