詳細介紹
中文名稱:活細胞核染料吖啶橙
英文名稱:Acridine Orange;AO
產(chǎn)品規(guī)格:25mg
發(fā)貨周期:1~3天
橙是一種熒光色素,其檢測激發(fā)濾光片波長488nm。阻斷濾光片波長515nm。它與細胞中DNA 和RNA 結(jié)合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA 結(jié)合量少發(fā)綠色熒光,與RNA 結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNA 和RNA 染色。 |
在熒光顯微鏡下觀察,橙可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。橙AO 常與溴化乙啶EB 合用雙染,因EB 只染死細胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。
用于細胞核染色時,推薦的橙工作濃度為0.1%。一般孵育條件是室溫避光15 分鐘。由于不同細胞對橙的攝取能力不同,該法不一定適用所有細胞。
儲存:-20℃,避光,有效期12月。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
百合(標準品)英文名稱: Lithium citrate, tetrahydrate紅膜蛋白4.2抗體包裝100g
百兩金A(標準品)英文名稱: MU-Gal轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白抗體包裝25g
百秋李(標準品)英文名稱: MU-GLU內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體包裝500g
百蕊草(標準品)英文名稱: MUP, disodium salt, trihydrate環(huán)磷腺苷調(diào)節(jié)鳥嘌呤核苷交換因子1抗體包裝25g
百蕊草I/山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷/阿福豆苷(標準...英文名稱: POPOP磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F1抗體包裝5g
柏子仁(標準品)英文名稱: PPO上皮特異性轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝100g
敗醬草(標準品)英文名稱: Sodium glycolate內(nèi)皮2抗體包裝25g
斑蝥(標準品)英文名稱: Span* 60內(nèi)皮受體蛋白酪激B3抗體包裝1g
板藍根(標準品)英文名稱: Titanium (IV) oxide軟骨外胚層發(fā)育不良相關(guān)蛋白抗體包裝250mg
半邊蓮(標準品)英文名稱: Triton X-405髓鞘蛋白P0樣蛋白2抗體包裝5g
半甘草異黃B英文名稱: Urinary trypsin inhibitor fragment雌激受體α抗體包裝25MG
半夏(標準品)英文名稱: Zinc oxide內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導蛋白2抗體包裝1g
半枝蓮(標準品)英文名稱: 4(5)-Methylimidazole鋅指蛋白521抗體包裝250mg
寶藿苷I,羊藿次苷II(標準品)英文名稱: Aluminum hydroxide大腸桿菌埃希桿菌O6抗體(腸致病性大腸桿菌O6)包裝5g
寶藿苷II;大花羊藿苷A;意卡瑞苷A(標準品)英文名稱: Ammonium phosphate, tribasic , trihydrate植物延展-β包裝100mg
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:總含量>95% ,進分痘帶狀皰疹病IgG試劑盒瑞香;7,8-Dihydroxycou
熒光假單胞菌Pseudomonas│fluorescens 質(zhì)量規(guī)格:>98%;NK1受體拮抗劑雙氫睪試劑盒肉桂;Cinnamyl alcohol
圍小從殼Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR衰變加速因子試劑盒肉桂;Cinnamaldehyde
活細胞核染料吖啶橙芴甲氧羰酰氯
其他氯甲-9-芴基甲酯;9-芴甲氧羰酰氯;氯甲-9-芴甲酯;9-氯甲芴甲酯;9-芴甲基氯甲酯;9-芴亞甲氧基甲酰氯
英文名稱:FMOC-C1
其他英文名稱:Chloroformic acid 9-fluorenylmethyl ester;9-Fluorenylmethyl chloroformate
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:50克/250克/1公斤
CAS號:28920-43-6
C15H11ClO2=258.70
級別:BR
含量:≥98.0%
熔點:63-64°C
干燥失重:≤0.2%
性狀:灰粉末,室溫下長期放置會緩慢分解。易吸潮,易分解
用途:生化研究。用于制備N-Fmoc基,用于固相多肽合成。 也用于毛細管電泳
保存:2~8℃
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)