培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
革蘭氏染液 |
| 100T | 1~3天 |
商品介紹:
革蘭氏染色法的意義就在于鑒別細(xì)菌,把眾多的細(xì)菌分為兩大類,革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。首先,細(xì)菌經(jīng)初染劑結(jié)晶紫初染成藍(lán)紫色,再加媒染劑與結(jié)晶紫結(jié)合成結(jié)晶紫-碘的復(fù)合物,從而增強(qiáng)了染料與細(xì)菌的結(jié)合力。 |
革蘭氏陽性細(xì)菌(G+)的細(xì)胞壁主要由肽聚糖形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組成,壁厚,類脂含量低,用脫色劑脫色時(shí)細(xì)胞壁脫水,使肽聚糖層的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)孔徑縮小,透性降低,從而使結(jié)晶紫-碘的復(fù)合物不易被洗脫而保留在細(xì)胞內(nèi),經(jīng)脫色和復(fù)染后仍保留初染劑的藍(lán)紫色。而革蘭氏陰性菌(G-)細(xì)胞壁類脂含量較多,肽聚糖層較薄且肽聚糖為平面片層結(jié)構(gòu),易被脫色劑溶解,使細(xì)胞壁通透性增高,結(jié)合的染料復(fù)合物容易泄漏,細(xì)菌被脫色為無色,再經(jīng)復(fù)染液復(fù)染為紅色。
1. 將涂片在火焰上固定,滴加R1 初染劑染1 分鐘,水洗。
2. 滴加R2 媒染劑作用1 分鐘后水洗。
3. 滴加R3 脫色劑,此時(shí)應(yīng)將玻片不時(shí)搖動(dòng),直至無紫色脫落為止,染30 秒鐘,水洗,水流不可太大。
4. 滴加R4 復(fù)染液染色30 秒,水洗,待干,鏡檢。
染色結(jié)果:革蘭氏陽性菌為紫色,革蘭氏陰性菌為紅色。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鹽恩諾沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Parthenolide蓬亂蛋白1抗體包裝5g
鹽二弗林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Parthenolide肌Dystrobrevin β蛋白抗體包裝1g
鹽二雙胍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rizatriptan異常凝血原/脫-γ-羧基凝血原抗體包裝5g
鹽二雙胍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Darunavir Ethanolate結(jié)蛋白抗體包裝1g
鹽二氧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: VilazodoneDISC1 C端抗體包裝5g
鹽伐昔洛韋/鹽萬乃洛韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DabigatranDISC1 N端抗體包裝100g
鹽非那吡啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Repaglinide多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體包裝25g
鹽非索非那定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Repaglinide結(jié)腸直腸癌缺失基因抗體包裝5g
鹽芬戈莫德(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-(-)-Arabinose 多巴脫羧抗體包裝1g
鹽酚芐明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-arabinose防御β1/Defensin β1抗體包裝5g
鹽呋喃它(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ferulic acid抗體包裝100g
鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ferulic acidDLX4抗體包裝25g
鹽桂利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Punicalagin (40%)DTX1抗體包裝100ml
鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Punicalagin絲裂原活化蛋白激磷-1抗體包裝250ml
鹽雜質(zhì) C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rosiglitazone HCL 絲裂原活化蛋白激磷-2抗體包裝100g
柴油食烷菌Alcanivorax│dieselolei 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,AR突觸泡蛋白抗體試劑盒商陸皂苷;Esculentoside
稀有桿菌Rarobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品突觸泡蛋白試劑盒石榴皮鞣;punicalin
: 東北巨大資源名稱: 枯草芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>760μg/MG,BR 突觸回蛋白2試劑盒鼠尾草;Carnosic acid
革蘭氏染液胸腺嘧啶
其他胸腺;5-甲基脲嘧啶;2,4-二羥基-5-甲基嘧啶;胸腺間氮;5-甲基-2,4(1H,3H)-嘧啶二
英文名稱:Thymine
其他英文名稱:5-Methyluracil;2,4-Dihydroxy-5-methylpyrimidine; 5-Methyluracil
產(chǎn)品規(guī)格:高純,99%
包 裝: 25克/100克/500克/1公斤
CAS號(hào):65-71-4
C5H6N2O2=126.12
級(jí)別:High purity grade
含量:≥99.0%
熔點(diǎn):320~330℃
干燥失重:≤1.0%
重金屬:≤20ppm
性狀:淺黃色結(jié)晶。100份25℃的水溶解本品0.358 份。易溶于熱水,溶于氫氧化銨和其他堿類,微溶于冷水,幾乎不溶于乙。大吸收波長(pH 7.0) 202.5、259.5nm(ε×10-3 9.2、8.2)。
用途:生化研究。有機(jī)合成
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