操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:葡萄糖代謝抑制劑
英文名稱:2-Deoxy-D-glucose 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1g|5g 2-Deoxy-D-glucose是一種葡萄糖類似物,為葡萄糖代謝抑制劑,通過作用于己糖激酶(hexokinase)來抑制糖酵解。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):154-17-6 別名:2-Deoxy-D-arabino-hexose;D-Arabino-2-deoxyhexose 純度:98.84% 分子量:164.16 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
秦氏蜜環(huán)菌腫瘤標(biāo)志物CYFRA21-1抗體Human FDP(Fibrinogen Degradation Product) ELISA Kit人凝血原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒
產(chǎn)紫青霉磷化原癌基因c-Jun抗體Human POTEG(POTE Ankyrin Domain Family Member G) ELISA Kit人凝血血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)免疫試劑盒
香菇周期A1蛋白抗體Human POTE-D(POTE-D(POTE Ankyrin Domain Family Member D)) ELISA Kit人凝血受體(TR)免疫試劑盒
太平洋大洋桿狀菌周期蛋白依賴性激抑制蛋白3抗體Human FETUB(Fetuin B) ELISA Kit人凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒
堅(jiān)脆嗜熱子囊菌角蛋白42Human FG(Fibrinogen) ELISA Kit人凝血(Thrombin)免疫試劑盒
環(huán)狀芽胞桿菌CD105抗體Human FcγR3B(Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIb Receptor) ELISA Kit人凝溶膠蛋白(Gelsolin)免疫試劑盒
德氏乳桿菌保加利亞亞種半胱蛋白蛋白-7抗體Human fFDFT1(Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA Kit人凝聚(CLU)免疫試劑盒
鮮綠青霉CD8/CD8-β抗體Human FDP(Fibrinogen Degradation Product) ELISA Kit人檸檬合成,線粒體(CS)免疫試劑盒
金龜子綠僵菌*周期蛋白依賴性激CABLES2抗體Human POTEG(POTE Ankyrin Domain Family Member G) ELISA Kit人尿微量白蛋白(MAU/ALB)免疫試劑盒
平菇兔抗雞IgY抗體Human POTE-E(POTE-E(POTE Ankyrin Domain Family Member E)) ELISA Kit人尿相關(guān)蛋白C(UreC)免疫試劑盒
假單胞菌屬20號(hào)染色體開放閱讀框128抗體Human FETUB(Fetuin B) ELISA Kit人尿皮免疫試劑盒
腐皮鐮孢菌色P450ⅡE1抗體Human POTE-D(POTE-D(POTE Ankyrin Domain Family Member D)) ELISA Kit人尿嘧啶核苷磷化1(UPP1)免疫試劑盒
黑曲霉B-淋巴趨化因子抗體Human fFDFT1(Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA Kit人尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)免疫試劑盒
毛韌革菌分裂周期蛋白23抗體Human FAIM3(Fas Apoptotic Inhibitory Molecule 3) ELISA Kit人尿激型纖溶原激活物(uPA)免疫試劑盒
莫哈韋芽孢桿菌結(jié)腸和肝腫瘤高表達(dá)蛋白抗體Human FAPα(Fibroblast Activation Protein Alpha) ELISA Kit人尿激(UK)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌周期蛋白依賴性激調(diào)節(jié)亞基1抗體Human FG(Fibrinogen) ELISA Kit人尿苷二磷葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移(UGCG)免疫試劑盒
雞痘病毒Avipoxvirus│Fowlpox virus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRA組鏈球菌多糖抗原試劑盒蟾它靈
#蟬花8-3Isaria│cicadae Miq. 質(zhì)量規(guī)格:BRA激PRKA錨定蛋白12試劑盒橙花叔
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BSAT豐富結(jié)合域1A試劑盒菖蒲
葡萄糖代謝抑制劑?;?/span>
其他2-基乙磺;牛膽堿;基乙磺;牛膽
英文名稱:Taurine
其他英文名稱:2-Aminoethanesulfonic acid;Aminoethylsulfonic acid;Ethylaminosulfonic acid
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:25克/100克/500克
CAS號(hào):107-35-7
C2H7NO3S=125.14
級(jí)別:BR
含量:≥99.0%
氯化物:≤0.01%
硫鹽:≤0.01%
銨鹽:≤0.02%
重金屬:≤10ppm
砷鹽:≤2ppm
干燥失重:≤0.20%
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.10%
性狀:針狀結(jié)晶或結(jié)晶性粉末,無臭、味微。12℃時(shí)溶于15.5份水,微溶于95%乙,溶于水,不溶于乙和,無任何毒副作用。不溶于無水乙。約300℃時(shí)分解。有刺激性。?;鞘求w內(nèi)一種非蛋白質(zhì)基,其廣泛存在于生物體中。它初是從雄牛的膽汁中發(fā)現(xiàn)的,?;遣荒芎推渌Y(jié)合成蛋白質(zhì),而是以游離形式存在或和膽汁形成復(fù)合物
用途:生化研究。有機(jī)合成。潤(rùn)濕劑
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