培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Bcr-Abl抑制劑(Nilotinib) | Nilotinib monohydrochloride monohydrate | 1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
商品介紹:
Nilotinib(AMN-107)是Bcr-Abl抑制劑,IC50低于30nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:923288-90-8 別名:AMN107 純度:99.91% 分子量:583.99 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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前列腺特異性G蛋白偶聯(lián)受體/嗅覺受體51E2抗體奇異變形桿菌小鼠子宮頸癌細(xì)胞
過氧化物體生成蛋白5相關(guān)蛋白抗體鼠傷寒沙門氏菌小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞
突觸富含脯膜蛋白7抗體金黃色葡萄球菌人睪丸精原細(xì)胞瘤細(xì)胞
Bcr-Abl抑制劑(Nilotinib)蒽醌
其他 9,10-蒽醌;9,10-蒽二;二基甲;9,10-二氫蒽-9,10-二;9,10-二氧蒽
英文名稱: Anthraquinone
其他英文名稱: 9,10-Anthracenedione;9,10-Dioxoanthracene;Dihydrodiketoanthracene;Ordinary anthraquinone;Morkit
產(chǎn)品規(guī)格: CP
包裝:100克
CAS號:84-65-1
C14H8O2=208.22
級別:CP
干燥失重:≤0.2%
熔點:284℃
甲溶解試驗:合格
性狀:幾乎無色或淡黃色結(jié)晶。微溶于乙和,不溶于水。相對密度(d204)1.42~1.44。熔點286℃。沸點377℃。閃點185℃。半數(shù)致死量(大鼠,腹腔)3500mG/kG。有刺激性。
用途:生化研究。有機合成
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