大鼠T淋巴細(xì)胞

大鼠T淋巴細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：人肝癌細(xì)胞人乳腺癌細(xì)胞耐藥株小鼠纖維原細(xì)胞人腦瘤細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞人結(jié)腸癌氟耐藥株抗TNF-α自身抗體ELISA試劑盒抗SS-B/La抗體ELISA試劑盒抗SSB/La抗體ELISA試劑盒抗SS-A/Ro抗體ELISA試劑盒抗SSA/Ro抗體ELISA試劑盒抗sp100抗體(sp100)ELISA試劑盒抗Smith抗體(Sm)ELISA試劑盒

組織來(lái)源：外周血組織

種屬來(lái)源：大鼠

細(xì)胞簡(jiǎn)介：T淋巴細(xì)胞來(lái)源于骨髓的多能干細(xì)胞  (胚胎期則來(lái)源于卵黃囊和肝)  。在人體胚胎 期和初生期 ，  骨髓中的一部分多能干細(xì)胞或前T細(xì)胞遷移到胸腺內(nèi) ，在胸腺激素的 誘導(dǎo)下分化成熟 ，成為具有免疫活性的T細(xì)胞。T細(xì)胞是相當(dāng)復(fù)雜的不均一體、可 將T細(xì)胞分成若干亞群 ，其中 ，Th細(xì)胞又被稱為CD4+細(xì)胞 ，  因?yàn)槠湓诒砻姹磉_(dá)    CD4。通過(guò)與MHCⅡ遞呈的多肽抗原反應(yīng)被激活。  MHCⅡ在抗原遞呈細(xì)胞表面  表達(dá)。一旦激活 ，可以分泌細(xì)胞因子 ，調(diào)節(jié)或者協(xié)助免疫反應(yīng)。Tc細(xì)胞又名為     CD8+細(xì)胞 ，其表面表達(dá)CD8.這類細(xì)胞可以通過(guò)MHCI 與抗原直接結(jié)合。

培養(yǎng)基：原代T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)

傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣 ，95%；  CO2 ，  5%
一、細(xì)胞基本屬性

二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三、使用方法

大鼠T淋巴細(xì)胞是一種懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。

4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。

公司正在出售的產(chǎn)品：

四、注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。