參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:羊口瘡病毒PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013563
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
Cyt-C(Mouse Cytochrome-C) ELISA Kit 小鼠Multi-class antibodies: 48T
SM-MHC/FITC 熒光標(biāo)記心肌肌凝蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DHRS7C 短鏈脫氫/還原家族7C抗體 0.2ml
Mouse IgG/Cy5.5 熒光Cy5.5標(biāo)記小鼠IgG(細(xì)胞流式同型對(duì)照) 0.1ml
LCA5L 致盲基因LCA5樣蛋白抗體 0.2ml
金霉檢測(cè)試劑盒 97孔/盒 動(dòng)物組織/產(chǎn)/蜂蜜/奶
SM-MHC/FITC 熒光標(biāo)記心肌肌凝蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Human C-Peptide ELISA Kit 人C肽Multi-class antibodies: 48T
Phospho-Lyn (Tyr497) 磷化膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KIF2B 有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣2B抗體 0.2ml
HBV preS2Ag(Human hepatitis B virus) ELISA Kit 人乙型肝炎病毒前S2抗原 96T
PROK2 前動(dòng)力蛋白2抗體 0.2ml
phospho-CDH2 (Tyr820) 磷化N-鈣粘附分子抗體 0.1ml
Phospho-Lyn (Tyr497) 磷化膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey Goat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLE1 核孔蛋白GLE1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASB3 錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族3抗體 0.2ml
HSP27/RBITC 紅色熒光羅丹明標(biāo)記熱休克蛋白-27抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG whole serum 兔抗小鼠IgG抗血清 1ml
Phospho-PKA C (Thr197)/FITC 熒光標(biāo)記磷化蛋白激C亞性抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
羊口瘡病毒PCR試劑盒50次乳乳球菌乳脂亞種種屬: Lactococcus│lactis subsp. cremoris提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0006生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
黑曲霉種屬: Aspergillus│niger提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 311生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
恥垢分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium smegmatis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
米根霉種屬: Rhizopus│oryzae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Gremlin-1蛋白(GREM1)ELISA試劑盒單組份性樣品溶劑 分≤0.01%二甲基三硫 98%溴酚藍(lán)鈉鹽
GDP解離抑制因子2(GdI2)ELISA試劑盒庫(kù)侖法無(wú)隔膜卡爾費(fèi)休試劑 用作電解液魚(yú)腥草 98%溴酚藍(lán)鈉鹽
G1/S特異性周期蛋白E1(CCNE1)ELISA試劑盒庫(kù)侖法通用型陽(yáng)用卡爾費(fèi)休試劑 用作有隔膜式陽(yáng)電解液2.5-二羥基-1.4-二噻 97%溴酚紅鈉
F-肌動(dòng)蛋白(F-actin)ELISA試劑盒庫(kù)侖法含吡啶陰用卡爾費(fèi)休試劑 *按G8 7600-87配制2,3-二乙基-5-甲基吡 98%硬脂丁酯(>98%,BR)
FOS 樣抗原2(FOSL2)ELISA試劑盒庫(kù)侖法酮測(cè)定陽(yáng)用卡爾費(fèi)休試 也可用作無(wú)隔膜電解液四氫噻吩-3-酮 98%C10E6,10%溶液
FMS樣酪氨激3配體(Flt-3L)ELISA試劑盒庫(kù)侖法安全型陽(yáng)用卡爾費(fèi)休試劑 不含甲、四氫噻吩-3-酮 ≥98%, Kosher, FGC12E10,10%溶液
FMS樣酪氨激3(Flt3)ELISA試劑盒庫(kù)侖法安全型陰用卡爾費(fèi)休試劑 不含甲、和四化碳反式-2,4-癸二烯 >90.0%(GC)C12E9, 10%溶液
Fc受體樣蛋白3(FCRL3)ELISA試劑盒庫(kù)侖法酮測(cè)定陰用卡爾費(fèi)休試 用作有隔膜陰電解液2,5-二甲基呋喃 99%無(wú)化鈣(>96%,Tech Grade)
FAS配體(Fas L)ELISA試劑盒單組份無(wú)吡啶卡爾費(fèi)休滴定劑 5mg/ml,測(cè)量較高樣品香草乙酯 97%次亞鈣(>98%,BR)
FAM172A蛋白(FAM172A)ELISA試劑盒單組份無(wú)吡啶卡爾費(fèi)休滴定劑 2mg/ml,測(cè)含量較低樣品4-乙基辛 98%鈣六(>98%,BR)
E選擇(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒異 >99.0%(GC)2-乙基-3,5-二甲基吡 99%草鈣一(>98%,BR)
E選擇(E-Sel)ELISA試劑盒異 >93.0%(GC)糠基硫 98%氧化鈣(>98%,BR)
E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒異 CP,98.0%糠基硫 97%氧化鈣(塊)(>98%,BR)
Ephrin-B2(EFNB2)ELISA試劑盒二異 98%乙糠硫酯 99%過(guò)氧化鈣(>75%,BR)
EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒三異 95%3-(2-呋喃基)烯 99%二氫鈣一(85%~95%,BR)
Egl九同源物1(EGLN1/C1orf12/PNAS-118/PNAS-137)ELISA試劑盒(±)-樟腦(合成) 96%甲基糠基二硫 98%焦鈣(>97%,BR)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。