培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途: 螺旋體、幽門(mén)螺旋桿菌、真菌、球菌等染色 注意事項(xiàng): 菌絲及顆粒呈黑色,背景呈棕黃色。染片不易腿色。 儲(chǔ)存條件:4℃,避光,3個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
(S)-布洛芬英文名稱(chēng): 2,6-Dibromoanthraquinone磷化p21激活激1抗體包裝25g
(S)-更昔洛韋-5'-三磷鋰鹽英文名稱(chēng): 2,7-Dibromofluorene磷化p21激活激2抗體包裝100g
(S)-蘭索拉唑英文名稱(chēng): 2,7-Dibromo-9-fluorenone磷化p21激活激3抗體包裝25g
(S)-美托洛爾英文名稱(chēng): 2,7-Dibromonaphthalene磷化p21激活激1/2/3抗體包裝100ml
(S)-萘普生異?;?β-D-葡萄糖苷英文名稱(chēng): 2,7-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]磷化核糖體S6蛋白激抗體包裝25ml
(S)-普拉克索二鹽化物英文名稱(chēng): 4,7-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體包裝500ml
(S)-去二基西酞普蘭鹽鹽英文名稱(chēng): 2,7-Dibromo-9,9-dimethylfluorene蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體包裝25g
(S)-坦索羅辛鹽鹽英文名稱(chēng): 2,2'-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]前列腺特異膜抗原抗體包裝5g
(S)-咯英文名稱(chēng): 2,7-Dibromo-9,9-dihexylfluorene磷脂酰肌激抗體包裝100g
(S)-西酞普蘭N-氧化物英文名稱(chēng): 2,7-Dibromo-9,9-di-n-octylfluorene胎盤(pán)生長(zhǎng)因子抗體包裝25g
(S)-西替利英文名稱(chēng): 2,5-Dibromothiazole蛋白激A抗體包裝5g
(S)-?;疗丈?β-D-葡萄糖苷英文名稱(chēng): 2,5-Dibromoselenophene蛋白激C beta 1/2抗體包裝1g
(S)-?;疗丈?β-D-葡萄糖苷芐基酯英文名稱(chēng): 2,6-Dibromonaphthalene胎盤(pán)生長(zhǎng)因子抗體包裝5g
(S)-腺苷,環(huán)3',5'-(氫化硫代磷酯)三乙基英文名稱(chēng): 1,3-Dibromo-7-tert-butylpyrene胎盤(pán)生長(zhǎng)因子抗體包裝1g
(S)-鹽奧昔布寧英文名稱(chēng): 6,12-Dibromochrysene外周髓鞘蛋白-22抗體包裝5g
: =ATCC9341資源名稱(chēng): 嗜根考克氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品骨成型蛋白7試劑盒低聚果糖套裝(蔗果三糖;蔗果四糖;蔗果五
純白鏈霉菌Streptomyces│candidus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品骨成型蛋白2試劑盒維生E(醋酯);純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證
: Biggis資源名稱(chēng): 問(wèn)號(hào)狀鉤端螺旋體 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品骨成型蛋白15試劑盒L-天門(mén)冬;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū)
Warthin-Starry銀染色液溶壁
其他細(xì)胞溶解
英文名稱(chēng):Lyticase
其他英文名稱(chēng):Lysing Enzymes from Arthrobacter luteus
產(chǎn)品規(guī)格:生物技術(shù)級(jí),200 u/mg,粉末
包裝:1克
產(chǎn)品規(guī)格:BR,10u/ul,液體
包裝:5KU
CAS號(hào):37340-57-1
級(jí)別:BioChemika
活力:≥200u/mg
活力定義:One unit will produce a ΔA800 of 0.001 per min at pH 7.5 at 25℃, using a suspension of yeast as substrate in a 3 mL reaction mixture
PH:4.8
性狀:淡黃色粉末,由青霉代謝產(chǎn)生。木聚糖分子只含一個(gè)亞基。分子量在8~30 kD間的為堿性蛋白,分子量在30~145 kD間的為性蛋白
用途:生化研究。木聚糖是木聚糖水解系中關(guān)鍵的水解,通過(guò)水解木糖分子β-1,4-糖苷鍵,將木聚糖水解為木寡糖和木二糖等低木聚糖,及少量木糖和阿拉伯糖
保存:2~8℃