BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒

BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒正在出售的產(chǎn)品：小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2澤瀉C-23-醋酯;澤瀉C單乙酯Human, Mouse
小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9澤瀉F(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人Ⅰ型膠原C端肽粘委陵菜（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat
大鼠脂蛋白磷脂A2戰(zhàn)骨（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat
小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-3獐牙菜苷（標(biāo)準(zhǔn)品

中文名稱：BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒

英文名稱：BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit

產(chǎn)品規(guī)格：共100ml

發(fā)貨周期：1～3天

組份規(guī)格：

試劑A：堿性磷酸酯酶顯色緩沖液 100ml

試劑B：BCIP 溶液(300X) 350μl

試劑C：NBT 溶液(150X) 700μl

使用說明

1. 對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品或膜，在與堿性磷酸酯酶標(biāo)記的抗體或其它形式的探針孵育后，用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5 次，每次3-5 分鐘。對(duì)于檢測(cè)內(nèi)源性堿性磷酸酯酶的組織或細(xì)胞樣品，在適當(dāng)固定后，也用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5 次，每次3-5 分鐘。

2. 按照如下比例依次加入各溶液，混勻后即配制成BCIP/NBT 染色工作液，配方如下：試劑A：堿性磷酸酯酶顯色緩沖液 3mL試劑B：BCIP 溶液(300X) 10μL試劑C：NBT 溶液(150X) 20μL染色工作液總體積：3.03mL

3. 后一次洗滌完畢后，去除洗滌液，加入適量BCIP/NBT 染色工作液，確保能充分覆蓋樣品。

4. 室溫避光孵育5-30 分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間(可長(zhǎng)達(dá)24 小時(shí))，直至顯色至預(yù)期深淺。

5. 去除BCIP/NBT 染色工作液，用蒸餾水洗滌1-2 次即可終止顯色反應(yīng)。

6. 對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品，顯色反應(yīng)終止后，如有必要可以用中性紅染色液(neutral red staining solution)染色，以便于觀察。對(duì)于膜，顯色反應(yīng)終止后，可以室溫晾干避光保存。

儲(chǔ)存：4℃，有效期一年。

注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性，則測(cè)定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè)，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

制霉菌（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sodium chloride鐵螯合抗體包裝1g

制霉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Guanidine hydrochlorideDH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體包裝1g

重長(zhǎng)春瑞賓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Adonitol磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體包裝5g

重腎上腺（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Yeast extract上皮粘附分子抗體包裝1g

周效磺(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： RNase A Solution酪蛋白激受體B2抗體包裝5g

注射用益氣復(fù)脈隨行對(duì)照品(暫行)英文名稱： D-Glucose, monohydrate表皮生長(zhǎng)因子抗體包裝1g

壯觀霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： SDS表皮生長(zhǎng)因子受體3抗體包裝5g

子囊霉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： PEG 6000酪蛋白激A4受體抗體包裝1g

組(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tween 20上皮鈣粘附分子抗體包裝5g

左卡尼?。?biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Triton X-100紅生成受體抗體包裝1g

左羥哌（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tryptone腦啡肽抗體包裝5g

左旋地平/磺左旋地平（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： D-BiotinEID2蛋白抗體包裝25ml

左旋奧沙利鉑（奧沙利鉑雜質(zhì)D）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Glycerol上皮粘附分子抗體包裝500ml

左旋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sodium citrate, trisodium salt, dehydrate紅膜相關(guān)蛋白ERMAP抗體包裝100g

左氧沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Gelatin腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1抗體包裝500g

竹瘤座菌Balansia│take (Miyake) Hara 質(zhì)量規(guī)格：含量98.0-102%,I型糖蛋白130試劑盒三七總皂苷;Panax notogins

纖細(xì)白僵菌Beauveria│brongniartii (Sacc.) Petch 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP32羰基還原[NADPH] 1試劑盒SN-38;7-Ethyl-10-Hyd

禽分枝桿菌Mycobacterium│avium 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品碳酐9試劑盒楊苷;Salicoside
BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒小麥胚芽粉

英文名稱： Wheat gern powder

產(chǎn)品規(guī)格： BR

包裝：500克

CAS號(hào)：68917-73-7

級(jí)別：BR

粗蛋白含量（干基）：≥30%

脂肪含量：≤1.5%

水分：≤12%

性狀：淺黃色粉末。

用途：生化研究。

保存：RT

操作規(guī)程：

1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)