培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途:
腺苷三磷酸酶染色
注意事項(xiàng):
主要由孵育液、、硫化銨、陰性對照孵育液等組成。酶活性部位呈棕黑色或黑色。
儲存條件:4℃,避光,6個(gè)月
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
麻楓樹酚B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: rU Phosphoramidite肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體包裝5g
(草)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bz-rA Phosphoramidite磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪激抗體包裝1g
(中)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: i-bu-rG Phosphoramidite絲裂原活化蛋白激13抗體包裝25g
根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dacomitinib多纖毛蛋白抗體包裝5g
麻醉椒苦英文名稱: Ac-rC Phosphoramidite肌管相關(guān)蛋白8抗體包裝100g
麻醉椒英文名稱: Tetrodotoxin巨噬甘露糖受體2抗體包裝25g
馬鞭草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetrodotoxin周期G1的相互作用蛋白抗體包裝5g
馬勃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ac-dC Phosphoramidite主導(dǎo)控制樣蛋白3抗體包裝1g
馬齒莧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2,2'-Anhydro-5-Me-U絲裂原活化蛋白激MKK3抗體包裝5g
馬兜鈴(北馬兜鈴)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 7-Deaza-7-I-2’-dGMYSM1抗體包裝1g
馬兜鈴A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 7-Deaza-7-I-2’-dA單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體包裝5g
馬兜鈴C英文名稱: Dideoxyadenosine微管相關(guān)蛋白1A抗體包裝10g
馬兜鈴D英文名稱: Xylitol中期因子/肝結(jié)合生長因子抗體包裝50g
馬兜鈴II英文名稱: Xylitol鹽皮質(zhì)激受體抗體包裝25g
馬蘭草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2',3'-Dideoxythymidine促黑激α抗體包裝5g
蠟樣芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:>98%抗狂犬病試劑盒莪術(shù)二;Germacr-1(10)-e
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗狂犬病試劑盒莪術(shù)烯;
匐枝青霉Penicillium│stoloniferum 質(zhì)量規(guī)格:BS抗狂犬病試劑盒1,3-O-二咖啡??鼘?Cynari
ATPase染色液(鈣鈷法)水楊鈉
其他 柳鈉;鄰羥基甲鈉;2-羥基甲單鈉鹽;楊鈉
英文名稱: Sodium salicylate
其他英文名稱: 2-Hydroxybenzoicacid monosodium salt;Salicylic acid sodium salt;Sodium o-hydroxybenzoate
產(chǎn)品規(guī)格: AR,99.5%
包裝:250克
CAS號:54-21-7
C7H5NaO3=160.10
級別:AR
含量:99.5~100.3%
澄清度試驗(yàn):合格
:≤0.03%
硫鹽:≤0.02%
氯化物:≤0.006%
水分:≤0.3%
堿度試驗(yàn):合格
重金屬:≤0.001%
性狀:鱗片狀結(jié)晶或粉末。無氣味。見光后變粉紅色。1g溶于0.9ml水、9.2ml乙、4ml甘油。水溶液呈,pH為5~6。低毒,半數(shù)致死量(大鼠,經(jīng) 口)1600mg/kg。有刺激性
用途:生化研究。點(diǎn)滴分析二氧化鈾。測胃液中游離。防腐劑。
保存:RT,避光