詳細介紹
服務流程:
1、根據(jù)客戶提供的基因序列設計特異性引物和熒光探針(染料法只需設計引物)
2、抽提DNA、RNA,并對RNA進行逆轉錄
3、實時熒光定量PCR
4、提供完整的實驗結果報告(檢測數(shù)據(jù)、溶解曲線、擴增曲線)
5、返還樣品(引物、RNA和cDNA)
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參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:轉基因品系玉米MON809染料法qPCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-12)活性比色法定量 GDA (Guanine deaminase) 1 Kit
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-12)活性比色法定量 GP2 (Pancreatic secretory granule membrane major glycoprotein GP2) 100 ul
細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性熒光定量 GNL3 (Guanine nucleotide-binding protein-like 3) 20 ul
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性熒光定量 GPM6B (Neuronal membrane glycoprotein M6-b) 100 ul
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性熒光定量 COLGALT2 (Procollagen galactosyltransferase 2) 100 ul
細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性比色法定量 GPIHBP1 (Glycosylphosphatidylinositol-anchored high density lipoprotein-binding protein 1) 100 ul
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性比色法定量 GNL3L (Guanine nucleotide-binding protein-like 3-like protein) 20 ul
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性比色法定量 GMPR2 (GMP reductase 2) 100 ul
細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-14)活性熒光定量 PIGR(Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) 100 ul
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-14)活性熒光定量 TCN2(Transcobalamin-2) 100 ul
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-14)活性熒光定量 GLG1 (Golgi apparatus protein 1) 100 ul
基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法(gelatin-zymography)電泳分析(MMP2/9) GIN1 (Gypsy retrotransposon integrase-like protein 1) 100 ul
基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)酪蛋白酶譜法(casein-zymography)電泳分析(MMP1/3/7/12/13) GCA(Grancalcin) 100 ul
基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)膠原蛋白酶譜法(collagen-zymography)電泳分析(MMP1/13) H2AFX(Histone H2AX) 1 Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)羧甲基轉鐵蛋白(CM transferrin -zymography電泳分析(MMP7) GLCE (D-glucuronyl C5-epimerase) 100 ul
細胞/組織蛋白(基質(zhì)金屬蛋白酶)樣品制備 LGALSL (Galectin-related protein) 100 ul
轉基因品系玉米MON809染料法qPCR試劑盒Penicillium│variabile Sopp分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Cedecea│sp.分離基物: 土壤/森林樹下土提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 近海細菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Aspergillus cristatus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0016生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Pichia│pastoris提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 表達、分泌磷脂酶培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法
Fomitopsis│rosea (Alb. & Schwein.) P. Karst.分離基物: 子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Listeria│monocytogenes分離基物: 病死豬腦提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 研究 教學用于病原菌目的基因檢測培養(yǎng)基: 396生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法;
Alphaherpesvirinae│Pseudorabies virus提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 研究培養(yǎng)基: 0生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Micromonospora│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0039生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Bacillus│idriensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 831生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法