培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Cole蘇木素染色液 |
| 100ml|500ml | 1~3天 |
商品介紹:
用途: 常規(guī)切片染色 注意事項(xiàng): 屬于明礬蘇木素的一種,采用酒精溶液氧化,存儲(chǔ)太久后,使用時(shí)應(yīng)過(guò)濾,染色時(shí)間一般20-45分鐘。 儲(chǔ)存條件:室溫,24個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
人參皂苷Rk1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Rebaudioside DMHC I類(lèi)鏈相關(guān)蛋白B包裝5g
人參皂苷Rk2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Geraniin膜蛋白MLC1抗體包裝1g
人參皂苷RK3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tyrosol磷化絲裂原活化蛋白激磷-1抗體包裝250mg
人參皂苷Ro(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Triptophenolide磷化絲裂原活化蛋白激磷-1抗體包裝100g
人工虎骨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Celastrol絲/蘇蛋白激MLK3抗體包裝25g
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Triptolide磷化絲/蘇蛋白激MLK3抗體包裝500g
忍冬藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Triptonide有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體包裝1g
絨毛龍芽草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Acteoside磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體包裝5g
鞣花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): (-)-Licarin B磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體包裝1g
肉蓯蓉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Reserpine磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體包裝1g
肉蓯蓉(管花肉蓯蓉)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Roburic acid磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體包裝250mg
肉蓯蓉苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Phillyrin肌球蛋白磷抗體包裝5g
肉豆蔻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Forsythoside A磷化肌球蛋白磷抗體包裝25g
肉豆蔻木脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Forsythoside B磷化肌球蛋白磷抗體包裝5g
肉豆蔻,十四烷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Liensinine磷化肌球蛋白磷抗體包裝100g
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%抗紡錘體抗體試劑盒豆甾;Stigmasterol
窄蓋針層孔菌Phellinus│tremulae (Bondartsev) Bondartsev & P.N. Borisov 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97.0%,標(biāo)準(zhǔn)品抗二氫嘧啶相關(guān)蛋白5試劑盒膽固;Cholesterol
澳大利亞平臍蠕孢Bipolaris│australiensis 質(zhì)量規(guī)格:>97%抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體試劑盒單寧;Glycerite
Cole蘇木素染色液叔丁氧羰基-L-谷5叔丁脂
其他N-BOC-L-天冬叔丁酯;N-Boc-L-天冬-5-叔丁酯;叔丁氧羰基-L-谷-5-叔丁酯
英文名稱(chēng):Boc-Glu(OtBu)-OH
其他英文名稱(chēng):Boc-L-glutamic acid 5-tert-butyl ester;N-tert-Butoxycarbonyl-L-glutamic acid gamma-tert-butyl ester
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:5克/25克/100克
CAS號(hào):13726-84-6
C14H25NO6=303.40
級(jí)別:BR
含量:≥98%(TLC)
比旋光度:-9.5±1o(c =1 in MeOH)
性狀:至類(lèi)粉末,熔點(diǎn)102~105℃
用途:生化研究。
保存:2~8℃