中文名稱:細(xì)胞核染料PI染色液(即用型)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:10ml|50ml
發(fā)貨周期:1~3天
熒光標(biāo)記是研究細(xì)胞凋亡的基本方法。細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化及生化學(xué)變化都可以通過熒光標(biāo)記的的方法而檢測出來,從而區(qū)別鑒別出正常細(xì)胞、壞死細(xì)胞或檢測細(xì)胞周期。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種DNA 結(jié)合性染料,其激發(fā)和發(fā)射波長分別為536nm 和617nm,產(chǎn)生紅色熒光,但無膜通透性,不能透過活細(xì)胞膜,只能染死細(xì)胞。因此,在熒光顯微鏡下觀察,正常細(xì)胞不能著色,壞死細(xì)胞呈強紅色熒光。采用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期時,凋亡細(xì)胞因內(nèi)源性核酸酶被激活,使DNA 廣泛降解、斷裂,DNA 結(jié)構(gòu)發(fā)生劇變,隨著凋亡的進(jìn)程,DNA 斷裂產(chǎn)生的小分子量DNA 溢出胞外,細(xì)胞總DNA 量降低,于正常G0/G1 細(xì)胞群前出現(xiàn)一DNA 低染細(xì)胞群,即G1 峰前出現(xiàn)亞二倍體峰(sub-G1)或稱A0 細(xì)胞群,即凋亡細(xì)胞群。用本試劑盒的PI 直接對細(xì)胞DNA 染色后,進(jìn)行流式細(xì)胞儀分析,即可檢測到凋亡細(xì)胞DNA 的變化。
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儲存:2-8℃,避光,有效期6個月。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
滇雞血藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Decanedioic acid4號染色體開放閱讀框43抗體包裝5g
滇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dehydroacetic acid細(xì)絲蛋白3抗體包裝1g
化木蘭花堿英文名稱: Demecolcine細(xì)絲蛋白2抗體包裝25g
靛玉紅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Deoxynivalenol磷化細(xì)絲蛋白2抗體包裝5g
丁公藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Devarda's alloy磷化FMS樣酪激3抗體包裝100mg
基酞(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Diacetyl monoxime肢體畸形相關(guān)蛋白FMN1抗體包裝1g
丁香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Diethyl maleate二單加氧3抗體包裝5g
丁香酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dihydrocytochalasin B二單加氧5抗體包裝1g
丁香樹脂雙葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Diisooctylamine磷化脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF1抗體包裝1g
丁香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dimethyl maleate果糖-3激抗體包裝5g
丁香葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dimethyl succinate精結(jié)合蛋白3抗體包裝100g
丁東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dimethylglyoxime sodium saltⅢ型纖維連接蛋白域蛋白3A抗體包裝25g
東風(fēng)桔(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Direct blue 71Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白4抗體包裝500g
東莨菪苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Direct red 80卵泡激結(jié)合蛋白2抗體包裝1g
東莨菪內(nèi)酯;7-羥基-6-氧基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-alpha-Phenylglycine葉鹽多谷合成抗體包裝1g
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白試劑盒10-羥基攀援山橙堿;10-Hydrox
施氏假單胞菌Pseudomonas│stutzeri 質(zhì)量規(guī)格:>98%,I型神經(jīng)激肽B試劑盒23-羥基白樺;Anemosapoge
擬諾卡氏菌屬菌種Nocardiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品神經(jīng)調(diào)節(jié)1亞型HRGβ1試劑盒青蒿;Artemisinic acid
細(xì)胞核染料PI染色液(即用型)五氯硝基
其他 硝基五氯;土粒散;掘地生;五氯硝
英文名稱: PCNB
其他英文名稱: Quintozine;Pentachloronitrobenzene
產(chǎn)品規(guī)格: 高純,99%
包 裝: 5克
產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%
包 裝: 25克/100克
CAS號:82-68-8
C6Cl5NO2=295.34
級別:High purity grade
含量:≥99.0%
熔點:143~148℃
甲溶解性實驗:合格
級別:BR
含量:≥98.0%
熔點:143~148℃
性狀:無色針狀結(jié)晶或奶油色細(xì)針狀。有異味。易溶于、、二硫化碳,幾乎不溶于水、冷乙。相對密度(d254)1.718。沸點328℃(部分分解)。有毒,半數(shù)致死量(大雄鼠,管飼法)1071mg/kg。有刺激性。能引起過敏
用途:生化研究。有機合成中間體。除草劑。劑。優(yōu)良的土壤劑,用作拌種劑和土壤處理劑,用于防治棉花立枯病、猝倒病,小麥、高梁腥黑穗病,馬鈴薯瘡痂病,甘蘭根腫病,萵苣灰霉病等。噴灑可防治水稻紋枯病
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