化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
組織來源：正常食管組織
種屬來源：兔
細胞簡介：食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，粘膜層與黏膜下層中的結(jié)締組織是由成纖維細胞構(gòu)成。
培養(yǎng)基：原代成纖維細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：長梭形，不規(guī)則細胞
傳代特性：根據(jù)細胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
一、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
兔食管成纖維細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X2047 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
兔食管成纖維細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈長梭形，不規(guī)則細胞，在技術(shù)部標準操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠脂肪干細胞 | 大鼠胚胎成纖維細胞 |
三聚氰胺抗體 | PE-Cy3標記的磷化膜相關(guān)蛋白酪氨激Lyn抗體 |
大鼠視網(wǎng)膜mulller細胞 | PE-Cy3標記的G蛋白偶聯(lián)受體6抗體 |
大鼠牙齦成纖維細胞 | PE-Cy3標記的6號染色體開放閱讀框186抗體 |
大鼠結(jié)膜囊成纖維細胞 | PE-Cy3標記的G蛋白偶聯(lián)受體31抗體 |
大鼠牙齦上皮細胞 | PE-Cy3標記的鋅指蛋白658抗體 |
大鼠鞏膜成纖維細胞 | PE-Cy3標記的髓鞘表達因子2抗體 |
大鼠視網(wǎng)膜微血管周細胞 | PE-Cy3標記的丙型肝炎病毒1b抗體 |
大鼠鼻腔粘膜上皮細胞 | PE-Cy3標記的DENND2A蛋白抗體 |
大鼠眼外肌成纖維細胞 | PE-Cy3標記的HAUS5蛋白抗體 |
大鼠眼微血管內(nèi)皮細胞 | PE-Cy3標記的溶質(zhì)載體家族蛋白19成員A1抗體 |
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 | 兔食管成纖維細胞PE-Cy3標記的GSDML蛋白抗體 |
大鼠視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細胞 | PE-Cy3標記的GTP結(jié)合蛋白REM1抗體 |
大鼠視網(wǎng)膜前體細胞 | PE-Cy3標記的DNAJC9蛋白抗體 |
小鼠支氣管上皮細胞 | PE-Cy3標記的核敏感元件結(jié)合蛋白1抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網(wǎng)