培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
KU-0063794是一種有效的,特異性的mTOR抑制劑,能夠抑制mTORC1和mTORC2,IC50值均約為10nM;對(duì)PI3Ks無(wú)作用。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):938440-64-3 純度:99.23% 分子量:465.54 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
臭曲霉環(huán)指蛋白113B抗體Anti-FABP2 Antibody煙堿型膽堿受體α4(CHRNα4)ELISA試劑盒
雞傷寒沙門(mén)氏菌環(huán)指蛋白165抗體Anti-FABP2 Antibody煙堿型膽堿受體α3(CHRNα3)ELISA試劑盒
豌豆根瘤菌環(huán)指蛋白186抗體Anti-FABP3 Antibody煙堿型膽堿受體α2(CHRNα2)ELISA試劑盒
鴨溫?fù)P球蟲(chóng)凋亡相關(guān)蛋白1抗體Anti-FABP3 Antibody煙堿型膽堿受體α1(CHRNα1)ELISA試劑盒
糙皮側(cè)耳磷化S6核糖體蛋白抗體 (Ser240/244)Anti-FABP4 Antibody亞鐵螯合(FECH)ELISA試劑盒
華麗閉核菌磷化Runx3抗體Anti-FABP4 Antibody亞硫鹽氧化(SUOX)ELISA試劑盒
黑白铦囊蘑RAS相關(guān)蛋白癌基因Rab14抗體Anti-FABP3 Antibody亞精合(SRM)ELISA試劑盒
老人頭(梭柄蘑)磷化視網(wǎng)膜母瘤樣蛋白p107抗體Anti-FABP3 Antibody(PB0803)亞甲基四氫葉脫氫2(MTHFD2)ELISA試劑盒
漢遜德巴利酵母漢遜變種磷化轉(zhuǎn)錄因子RelB蛋白抗體Anti-FABP4 Antibody亞甲基四氫葉脫氫1(MTHFD1)ELISA試劑盒
茄腐鐮刀菌環(huán)指蛋白148抗體Anti-FABP4 Antibody亞甲基四氫葉還原(MTHFR)ELISA試劑盒
飲料 G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子5抗體Anti-FABP5 Antibody牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP1)ELISA試劑盒
白乳菇成視網(wǎng)膜瘤基因抗體Anti-FABP5 Antibody牙本質(zhì)涎磷蛋白(DSPP)ELISA試劑盒
Orbilia新朊蛋白抗體Anti-FABP5 Antibody血幼(HJV)ELISA試劑盒
谷棒桿菌磷鞘裂解1抗體Anti-FABP5 Antibody血型糖蛋白E(GYPE)ELISA試劑盒
土曲霉可溶性E選擇Anti-FABP6 Antibody血型糖蛋白C(GYPC)ELISA試劑盒
居真菌細(xì)菌可溶性P選擇抗體Anti-FABP6 Antibody血型糖蛋白B(GYPB)ELISA試劑盒
信號(hào)誘導(dǎo)增殖相關(guān)蛋白1抗體蕁麻青霉Hela人子宮頸癌細(xì)胞
絲/蘇蛋白激40抗體黑根霉SMMC7721人肝癌細(xì)胞
T淋巴細(xì)胞激活蛋白抗體尖孢鐮孢菌(斜面)MCF-7人乳腺癌細(xì)胞
促黃體激誘導(dǎo)蛋白5抗體亮白曲霉(無(wú)法提供)T24人膀胱癌細(xì)胞
mTOR抑制劑(KU-0063794)黃原膠
其他 黃膠;漢生膠;昔嘌呤樹(shù)膠;黃單胞菌多糖;甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌膠;黃單胞多糖
英文名稱: Xanthan gum
其他英文名稱: Gum xanthan
產(chǎn)品規(guī)格: BR
包 裝: 500克
CAS號(hào):11138-66-2
分子式:(C35H49O29)n
相對(duì)分子質(zhì)量:>106
級(jí)別:BR
粘度(1%KC1):≥1200 cps
PH(1%HC1):6.0~8.0
干燥失重:≤13%
灰分:≤13%
:≥1.5
性狀:黃原膠是一種生物合成膠,呈淡黃色粉末,是以玉米淀粉為主要原料,由微生物黃單孢桿菌在特定的條件下發(fā)酵,再經(jīng)提煉、干燥、研磨而制成的高分子多糖聚合物。無(wú)氣味。有吸濕性。易溶于水。在低濃度時(shí)經(jīng)攪拌即成粘稠溶液。水溶液為高假塑體。
用途:生化研究。食品、非食品和化妝品用穩(wěn)定劑和乳化劑。
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