培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹: 用途: 顯示細(xì)胞中堿性蛋白,尤其是組蛋白 注意事項(xiàng): 細(xì)胞核大部分被染成綠色。
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儲存條件:室溫,避光,12個月
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
止瀉木子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: H-Pyr-OH人內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病膜糖蛋白2抗體包裝5g
枳殼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Z-Pyr-OHBeta基己糖苷beta亞基蛋白B鏈抗體包裝1g
枳實(shí)(橙)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-m-TyrosineHEXIM2蛋白抗體包裝250mg
制何首烏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: H-Sar-OMe·HCl3'-5'外切1蛋白抗體包裝10g
腫節(jié)風(fēng)(草珊瑚)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Isoleucinol型肝炎病NS5B抗體包裝100g
重樓(云南重樓)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Leucinol缺氧誘導(dǎo)基因1C蛋白抗體包裝25g
重樓皂苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-LeucinolHEG同源蛋白1抗體包裝500g
重樓皂苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Phenylalaninol人腫瘤抑制蛋白抗體包裝1g
重樓皂苷VII(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-TryptophanolHemk基轉(zhuǎn)移家族1號蛋白抗體包裝5g
重樓皂苷VI(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fmoc-ValinolHemk基轉(zhuǎn)移家族2號蛋白抗體包裝1g
珠子草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-ValinolHEN1基轉(zhuǎn)移同源蛋白1抗體包裝250mg
豬膽粉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Phenylglycinol缺氧誘導(dǎo)基因2蛋白抗體包裝5g
豬苓C英文名稱: BOC-L-Prolinol乙肝病衣殼蛋白抗體包裝25g
豬去氧膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Amino-1,3-propanediol 型肝炎病1a基因型NS5蛋白抗體包裝5g
豬牙皂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Methyl-d-Aspartic Acid戊型肝炎病抗體包裝50g
鮑曼/醋鈣復(fù)合不動桿菌Acinetobacter│baunannii/calcoaceticus complex 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品流感B病試劑盒10-氧基喜樹堿;10-Methoxy
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR流感B病試劑盒基丁香酚;Methyl eugenol
暫無Haematobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品流感A病抗體IgG elisa試劑盒巨豆三烯;Tabanone
堿性蛋白染色液(細(xì)胞專用)碳?xì)溻?/span>
其他 重碳鉀;性碳鉀;式碳鉀
英文名稱: K-Lyte
其他英文名稱: Potassium hydrogen carbonate;Potassium acid carbonate;Kafylox
產(chǎn)品規(guī)格: AR,99.5%
包裝:500克
CAS號:298-14-6
KHCO3=100.12
級別:AR
含量:≥99.5%
pH(50g/L,25℃):≤8.6
氯化物:≤0.005%
總氮量:≤0.001%
氯化物:≤0.005%
硫鹽:≤0.005%
澄清度試驗(yàn):≤4號
水不溶物:≤0.002%
鈉:≤0.02%
鎂:≤0.003%
鐵:≤0.0005%
鈣:≤0.003%
磷鹽及硅鹽:≤0.005%
性狀:無色透明結(jié)晶或粉末。有吸濕性。100~200℃分解。溶于2.8份水、2份50℃的水,溶于碳鉀溶液,幾乎不溶于乙。將水溶液煮沸則逸出二氧化碳而成為碳鉀。0.1mol/L水溶液的pH為8.2。相對密度2.17。折光率1.482。
用途:生化研究。分析試劑。焙粉。發(fā)泡鹽。
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