商品介紹:
NF-κB是一個(gè)多向性核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,可調(diào)節(jié)細(xì)胞因子、趨化因子、粘附分子、生長(zhǎng)因子、免疫受體、氧化應(yīng)激相關(guān)酶、轉(zhuǎn)錄因子、急性時(shí)相蛋白等基因的表達(dá),功能涉及相應(yīng)的許多生理、病理過(guò)程。 DAPI 是一種藍(lán)色核酸染料,優(yōu)先染dsDNA,DAPI 表現(xiàn)為可集中結(jié)合在DNA 雙鏈的AT 小溝,結(jié)合后的DAPI 熒光會(huì)發(fā)生20倍增強(qiáng)。同時(shí),DAPI 也可以結(jié)合RNA,與DNA 不同,一般認(rèn)為DAPI 結(jié)合于RNA 的AU 區(qū)。DAPI/RNA 的復(fù)合體(500nm)有比DAPI/dsDNA 復(fù)合體(460nm)更長(zhǎng)的熒光波長(zhǎng)。DAPI 是一種常用的多色熒光技術(shù)中的核復(fù)染劑。
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NF-κβ作為一種廣泛存在的轉(zhuǎn)錄因子,被激活由胞漿轉(zhuǎn)入胞核,從而參與炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)、細(xì)胞凋亡、腫瘤發(fā)生等??梢詫⒓?xì)胞核和NF-κβ分別用DAPI 和FITC 染色,F(xiàn)lowSight 可觀察每個(gè)細(xì)胞是否發(fā)生NF-κβ核轉(zhuǎn)位,并量化分析NFkB 核轉(zhuǎn)位程度以及發(fā)生核轉(zhuǎn)位細(xì)胞的比例。
儲(chǔ)存:4℃避光,有效期12個(gè)月。
產(chǎn)品屬于:
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鹽米安色林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): PantoprazoleSodium Sesquihydrate橋粒芯蛋白3抗體包裝5g
鹽米諾環(huán)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): PantoprazoleSodium Sesquihydrate癌基因刪除蛋白2抗體包裝100g
鹽米托蒽醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): (s)-10-hydroxycamptothecinDNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白4抗體包裝25g
鹽莫索尼定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): (s)-10-hydroxycamptothecin癌相關(guān)蛋白DRES17抗體包裝5g
鹽莫西沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Liquiritigenin周期調(diào)控蛋白SDP35抗體包裝1g
鹽奈福泮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Liquiritin apiosideDNA損傷自噬調(diào)整蛋白抗體包裝25g
鹽萘唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Isoliquiritin apioside腦發(fā)育同源蛋白1抗體包裝5g
鹽萘替芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Chelerythrine間粘附分子非整合蛋白3抗體包裝25g
鹽尼非卡蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): NVP-TAE684膜蛋白Derlin抗體包裝5g
鹽尼卡地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Artemisic acid二脂酰甘油?;D(zhuǎn)移抗體包裝25g
鹽尼卡地平雜質(zhì)(2,6-二基-4-(3-基)...英文名稱(chēng): Fangchinoline轉(zhuǎn)錄因子DP1抗體包裝5g
鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Solasurine間粘附分子非整合蛋白3抗體包裝1g
鹽帕洛諾司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sparteini SulfasDNA依賴(lài)性蛋白激抗體包裝250g
鹽哌侖西平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): (-)-Sparteini Sulfas磷化DNA依賴(lài)性蛋白激抗體包裝500g
鹽哌唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Synephrine磷化DNA依賴(lài)性蛋白激抗體包裝25g
: =YIM45988資源名稱(chēng): 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品鐵調(diào)試劑盒穗花杉雙黃;Amentoflavone
葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP30,BR鐵蛋白重鏈試劑盒斯皮諾;Spinosin
蘇云金芽孢桿菌加拿大亞種Bacillus│thuringiensis subsp. canadensis de Barjac and Bonn 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品鐵蛋白試劑盒Ⅳ;Sudan IV;Solven
核轉(zhuǎn)位分析試劑盒(單分子轉(zhuǎn)位)(FM法)新霉硫鹽
其他硫新霉
英文名稱(chēng):Neomycin sulfate
其他英文名稱(chēng):Mycifradin sulfate
產(chǎn)品規(guī)格:USP級(jí),600mcg/mg
包裝:10克/100克/500克
CAS號(hào):1405-10-3
C23H46N6O13•3H2SO4=908.9
級(jí)別:USP Grade
效價(jià):≥600IU/mg
比旋光度:+53.5~+59.0°
PH(3.3% water):5.0~7.5