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詳細(xì)介紹
商品介紹：
A-196是有效的選擇性SUV420H1和SUV420H2化學(xué)抑制劑，在多種細(xì)胞系中抑制H4K20me二甲基化和三甲基化。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 純度：95.36% 分子量：359.25 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
A-196 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1～3天 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
根瘤菌Halobiforma haloterrestris
黃傘Pediococcus cellicola
釀酒酵母Vibrio aerogenes
釀酒酵母Vibrio hispanicus
草莓蛇眼小球殼菌Vibrio lentus
聚生殼菌Acinetobacter lwoffii
釀酒酵母Pseudoalteromonas sp.
粉紅粘帚霉Rhodococcus erythropolis
腐皮鐮孢菌Bacillus sp.
棕灰口蘑Sterotrophomonas maltophilia
韓國康氏菌Brevundimonas vesicularis
釀酒酵母Flavobacterium saliperosum
放射形根瘤菌Flavobacterium sp.
安絡(luò)小皮傘*Flavobacterium sp.
聚生殼菌Flavobacterium sp.
解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種Pseudomonas viridiflava
磷化磷酯Cβ3抗體輪枝鏈霉菌婁地青霉
磷化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)１抗體擬隱殼孢屬菌種紫色鏈霉菌
磷化多配體聚糖4Ser179抗體志賀氏痢疾桿菌金霉鏈霉菌
磷化類固受體輔助活化因子-3大腸埃希氏菌DH5α/pET30a-garA糞腸球菌
SUV420H1和SUV420H2化學(xué)抑制劑（A-196）L-甲硫乙酯鹽鹽
其他L-蛋乙酯鹽鹽
英文名稱：L-Methionine ethyl ester hydrochloride
其他英文名稱：Ethyl L-methionate hydrochloride；Ethyl 2-amino-4-(methylthio)butanoate hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格：特純
包裝：5克/25克/100克
CAS號：2899-36-7
C7H15NO2S•HC1=213.73
級別：Purum
含量：≥99.0%
熔點：90～92℃
比旋光度：+21°(c = 2 in ethanol)
性狀：結(jié)晶粉末
用途：生化研究。
保存：RT
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