操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:溶酶體染色試劑盒(黃色/藍(lán)色熒光)-L05
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:125T|250T
發(fā)貨周期:1~3天
溶酶體染色試劑盒是利用L系列探針進(jìn)行溶酶體特異性染色的試劑盒。
L系列探針是一種細(xì)胞滲透型的對(duì)活細(xì)胞中的溶酶體體進(jìn)行選擇性染色的一類新型熒光染料,該系列探針可以選擇性標(biāo)記溶酶體。只需簡(jiǎn)單孵育細(xì)胞,即可穿過細(xì)胞膜并直接聚集在活性溶酶體上??捎行?biāo)記活細(xì)胞。
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本試劑盒中的L05溶酶體染色探針能選擇性定位于溶酶體,L05的熒光性在低pH 值時(shí)不會(huì)降低,并且具有雙激發(fā)雙發(fā)射的特性,在低pH時(shí),L05發(fā)出強(qiáng)烈的黃色熒光,在高pH時(shí)發(fā)出強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光。這種*pH 依賴熒光使得L05能做為理想的溶
酶體探針,除了選擇性標(biāo)記溶酶體外,還可以用來檢測(cè)溶酶體內(nèi)pH 值的變化。
L05溶酶體黃/藍(lán)色熒光標(biāo)記的溶酶體探針,具有384/540nm和328/440nm的大激發(fā)/發(fā)射波長。
儲(chǔ)存條件:染料-20℃避光保存;避免反復(fù)凍融;稀釋液2-8℃保存。
有效期:6個(gè)月
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
苦參新F英文名稱: Stearic acidG蛋白偶聯(lián)受體35抗體包裝1g
苦地丁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SulfolaneG蛋白偶聯(lián)受體37/帕金森相關(guān)內(nèi)皮受體樣受體抗體包裝1g
苦鬼臼英文名稱: SulfolaneG蛋白偶聯(lián)受體40抗體包裝1g
苦楝皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TetradecaneG蛋白偶聯(lián)受體43抗體包裝25g
苦木(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tributyl phosphateG蛋白偶聯(lián)受體44抗體包裝5g
苦蘇花皂苷C英文名稱: 1,2,3,4-TetrahydronaphthaleneG蛋白偶聯(lián)受體45抗體包裝1g
苦杏仁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triethyl phosphate同源盒蛋白GSC抗體包裝25g
苦玄參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tridecane脊髓性肌癥蛋白Gemin4抗體包裝5g
苦玄參苷IA(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Tetradecanol脊髓性肌癥蛋白Gemin5抗體包裝250mg
苦玄參苷IB英文名稱: Undecane脊髓性肌癥蛋白Gemin7抗體包裝1g
苦玄參苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Undecanoic acidGTP結(jié)合絲裂原誘導(dǎo)T蛋白抗體包裝5g
苦玄參苷X(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Undecanone染色體卷曲螺旋域包含蛋白1抗體包裝1g
寬筋藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: cis-4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoic acid methyl ester脊髓性肌癥蛋白Gemin6抗體包裝5g
寬葉纈草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: cis-5,8,11,14,17-Eicosapentaenoic acid磷化膠質(zhì)纖維性蛋白抗體包裝1g
款冬花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Celite 545自主生長因子GFI1抗體包裝250mg
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品鞘磷脂試劑盒檸檬苦;Limonin
病毒Influenzavirus A│Avian influenza virus 質(zhì)量規(guī)格:>95%,美國進(jìn)口原裝鞘激1試劑盒尼泊金丁;Butylparaben
籃狀菌屬Talaromyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:BR,培養(yǎng)級(jí),純度大于99%鞘試劑盒牛蒡子苷;Arctiin
溶酶體染色試劑盒(黃色/藍(lán)色熒光)-L05胃粘膜
其他粘液II;粘液III;胃膜
英文名稱:Mucin from porcine stomach
產(chǎn)品規(guī)格:BR,豬腸胃
包裝:1克/5克
CAS號(hào):84082-64-4
級(jí)別:BR
Bound sialic acid:0.5~1.5%
性狀:粉末。粘蛋白中糖鏈占全分子量的50%以上,有時(shí)可達(dá)80%。單聚糖以O(shè)-糖苷鍵結(jié)合在核蛋白的側(cè)鏈,并以共價(jià)鍵互相結(jié)合,形成分子量數(shù)百萬的巨大分子。分子內(nèi)含有大量的水分,形成膠體,覆蓋在粘膜表面。
用途:生化研究。粘蛋白是上皮細(xì)胞產(chǎn)生的主要成分,對(duì)細(xì)胞起著保護(hù)和潤滑的作用。
保存:2~8°C