中文名稱:細(xì)胞周期與凋亡檢測試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50次/200次/500次
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品原理:本產(chǎn)品檢測原理基于碘化丙啶(Propidium, PI)染色方法分析細(xì)胞周期和凋亡。碘化丙啶是一種雙鏈DNA染料,其嵌入雙鏈DNA中可以產(chǎn)生熒光,并且熒光的強(qiáng)度和雙鏈DNA的量成正比。 |
在細(xì)胞周期中,G0和G1期細(xì)胞有一套染色體,G2和M期細(xì)胞有兩套染色體,S期介于兩者之間。經(jīng)過碘化丙啶染色后,處在不同細(xì)胞周期中的細(xì)胞的熒光強(qiáng)度是不一樣的。假定G0和G1期的細(xì)胞熒光強(qiáng)度為1,那么G2和M期的細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為2,S期的細(xì)胞介于1和2之間。
細(xì)胞凋亡時(shí),由于細(xì)胞核皺縮和DNA片段化,染色時(shí)DNA片段會(huì)從打孔的細(xì)胞膜處丟失,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),熒光強(qiáng)度小于1,即Sub-G1峰或者凋亡細(xì)胞峰。
細(xì)胞凋亡也可以用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞光散射的變化來檢測。凋亡前期,染色質(zhì)皺縮,細(xì)胞密度增加,前向角光散色顯著降低。凋亡后期,細(xì)胞產(chǎn)生凋亡小體,前向角光散射和側(cè)向角光散色都顯著降低。
產(chǎn)品適用:本試劑盒可用于培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或者懸浮細(xì)胞檢測,也可用于組織細(xì)胞檢測。
保存條件:-20°避光條件下,保存1年以上,4°避光條件下,可以保存2個(gè)月。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
對(duì)羥基乙酰(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dolasetron mesylate 8號(hào)染色體開放閱讀框72抗體包裝5g
多尼培南(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Doxepin HCl 7號(hào)染色體開放閱讀框30抗體包裝5MG
多潘立酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Doxepin HCl 7號(hào)染色體開放閱讀框57抗體包裝1g
多索茶堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Duloxetine hcl7號(hào)染色體開放閱讀框36抗體包裝1g
多效唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Duloxetine hcl7號(hào)染色體開放閱讀框42抗體包裝1g
鵝去氧膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dutasteride7號(hào)染色體開放閱讀框43抗體包裝5g
厄貝沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dutasteride7號(hào)染色體開放閱讀框44抗體包裝1g
厄多司坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Edaravone8號(hào)染色體開放閱讀框40抗體包裝5g
恩諾沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Edaravone8號(hào)染色體開放閱讀框37抗體包裝1g
恩曲他濱(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hydroquinidine8號(hào)染色體開放閱讀框45抗體包裝10g
恩替卡韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Epinastine HCl8號(hào)染色體開放閱讀框80抗體包裝50g
二基-(2-)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Epinastine HCl9號(hào)染色體開放閱讀框3抗體包裝1g
二基-(2-)(克霉唑雜質(zhì)I,標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Eplerenone8號(hào)染色體開放閱讀框47抗體包裝250mg
二酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Eplerenone8號(hào)染色體開放閱讀框48抗體包裝25ml
二倍他米松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Etodolac8號(hào)染色體開放閱讀框58抗體包裝25g
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%胸腺嘧啶核苷磷化試劑盒喜樹堿;Camptothecine
鮮綠青霉Penicillium│viridicatum 質(zhì)量規(guī)格:≥580IU/ mg,BR胸腺基質(zhì)淋巴生成試劑盒新橙皮苷二氫查爾酮;Neosperidi
淡紫擬青霉Paecilomyces│lilacinus 質(zhì)量規(guī)格:含量測定胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子試劑盒西紅花苷II;Crocin II
細(xì)胞周期與凋亡檢測試劑盒鹽三乙胺
其他 三乙胺鹽鹽;2,2',2''-次氮基三乙鹽鹽
英文名稱: Triethanolamine hydrochloride
其他英文名稱: Tri(hydroxyethyl)amine hydrochloride;2,2′,2″-Trihydro- xytriethylaminehydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格: CP,99%
包裝:100克
CAS號(hào):637-39-8
C6H15NO3•HC1=185.65
級(jí)別:CP
含量:≥99.0%
熔點(diǎn):177~188℃
溶解性試驗(yàn):合格
性狀:結(jié)晶。有吸濕性。易溶于水,極微溶于乙
用途:生化研究。測量錫和銻。軟化劑。合成樹脂。
保存:RT,避光