詳細介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:Propidium Iodide染色液(PI,碘化丙啶)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100T
發(fā)貨周期:1~3天
PI染色液可用于細胞凋亡檢測,也可用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色,染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細胞儀檢測。Propidium Iodide是一種DNA 結(jié)合性染料,其激發(fā)和發(fā)射波長分別為488nm和630nm,產(chǎn)生紅色熒光,但無膜通透性,不能透過活細胞膜,只能染死細胞。因此,在熒光顯微鏡下觀察,正常細胞不能著色,早期凋亡細胞呈微弱紅光,晚期凋亡細胞紅光加強,壞死細胞呈強紅色熒光。也可采用流式細胞儀利用細胞形態(tài)上的改變影響它們的光散射特性改變進行分析,還可與RNase A結(jié)合進行細胞周期分析。 |
儲存條件:4℃避光保存。長期保存-20℃避光保存。
有效期:六個月。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
莪術二(標準品)英文名稱: Graphite powderFBXO28蛋白抗體包裝5g
莪術呋喃二烯英文名稱: Hexylene glycolFBXW5蛋白抗體包裝1g
莪術烯(標準品)英文名稱: HMPA, hexamethylphosphoramideFBXW12蛋白抗體包裝5g
鵝不食草(標準品)英文名稱: Hydrindantin hydrateFBXO42蛋白抗體包裝1g
厄弗酚英文名稱: Hydroxypropyl celluloseFasL抗體包裝250mg
餓螞蝗(標準品)英文名稱: Indoxyl-Gal原纖維蛋白1抗體包裝5g
蒽醌(標準品)英文名稱: Indoxyl-Glucuronide胰腺衍生因子抗體包裝1g
兒茶(兒茶)(標準品)英文名稱: Iodobenzene性成纖維生長因子抗體包裝5g
兒茶沒食子酯英文名稱: Iron (II) sulfide凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關抗原抗體包裝1g
二基庚烷A(標準品)英文名稱: Iron (II,III ) oxide凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關抗原抗體包裝1g
二羥茶堿(標準品)英文名稱: Iron (III) oxideFas死亡結(jié)構(gòu)域相關蛋白包裝5g
二氫丹參I(標準品)英文名稱: ron powder reduced胰腺衍生因子抗體包裝100ml
二氫辣椒堿(標準品)英文名稱: Isophorone補體因子H抗體包裝25ml
二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯(標準品)英文名稱: Isovanillin磷化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關蛋白抗體包裝1g
二氫歐山芹當歸酯(標準品)英文名稱: IsovanillinFas相關1因子抗體包裝5g
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR上皮特異性抗原試劑盒去芹菜糖桔梗皂苷D;Deapio-pla
: DSM44492資源名稱: 擬諾卡氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%傷寒抗體試劑盒千層紙A-7-0-β-D-葡萄糖苷
青霉屬菌Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%傷寒試劑盒千金子二萜二乙酰酰酯;5,15-D
Propidium Iodide染色液(PI,碘化丙啶)無水甜菜堿
其他甜菜;銨乙內(nèi)酯;甘胺內(nèi)鹽;基甘
英文名稱:Betaine
其他英文名稱:Methanaminium;2-(Trimethylammonio)ethanoic acid hydroxide inner salt; (Carboxymethyl)trimethylammonium hydroxide inner salt;Glycine betaine;Trimethylammonioacetate
產(chǎn)品規(guī)格:超純,99%
包 裝: 100克
CAS號:107-43-7
C5H11NO2=117.15
級別:Ultra Pure Grade
含量:≥99.0%
熔點:301~305℃
PH(25%,25℃,水溶液):0.8~1.2
熔點:233~238℃
比旋光度:-68°~-72°
干燥失重:≤0.50%
重金屬:≤10ppm
性狀:結(jié)晶性粉末。溶于水,熱時更易溶解,有雜質(zhì)存在時溶解度顯著增加;極難溶于乙。易為稀無機水解得到腺嘌呤和D核糖。無氣味。微有咸苦味。對空氣、光敏感。在真空中加熱至110℃變?yōu)闊o水物。pH 2時大吸收波長257nm ,摩爾吸光系數(shù)14600
用途:生化研究。阿糖腺苷(Ara-AR)、腺苷三磷(ATP)、(COASH)及環(huán)磷腺苷(CAMP)等的主要原料
保存:2~8℃,避光