詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
100T | 1~3天 |
商品介紹:
臺盼藍(lán)染色液主要用于細(xì)胞染色,用來檢測細(xì)胞的存活率。臺盼藍(lán)受到活體細(xì)胞的排斥,而死亡細(xì)胞攝入染料顯示藍(lán)色。通過常用的光學(xué)顯微鏡可以觀察到細(xì)胞染色情況,同時(shí)可以定量計(jì)數(shù),實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞存活率比較精確的定量分析。 |
儲存條件:4℃保存。
有效期:一年。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
蜂房(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Magenta-GalFISH蛋白抗體包裝5g
蜂膠(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Magnesium citrate nonahydrate脂肪脫氫2抗體包裝5g
鳳尾草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Magnesium dodecyl sulfate法尼基二磷法尼基轉(zhuǎn)移1/鯊烯合成抗體包裝25g
鳳仙萜四苷A英文名稱: Magnesium fluoride叉頭蛋白D3抗體包裝5g
鳳仙萜四苷B英文名稱: Magnesium hydroxide叉頭蛋白B1抗體包裝10g
鳳仙萜四苷C英文名稱: Magnesium stearate纖維蛋白原β鏈抗體包裝5g
鳳仙萜四苷F英文名稱: Malachite green hydrochloride構(gòu)成激活過氧化活化增生受體γ樣蛋白2抗體包裝1g
鳳仙萜四苷G英文名稱: Manganese (II )sulfate anhydrous成蛋白相關(guān)蛋白1抗體包裝25g
鳳仙萜四苷K英文名稱: Prothionamide腫瘤病受體同源蛋白抗體包裝5g
鳳仙萜四苷M英文名稱: Prothionamide成纖維生長因子11抗體包裝1g
佛手(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Deuterium OxideHSD13蛋白抗體包裝25g
佛手柑內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Deuterium OxideWnt信號受體FZD2蛋白抗體包裝5g
佛手柑;香檸檬;佛手柑亭;香檸檬亭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Deuterium Oxide口蹄疫病包裝100g
佛司可林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Deuterium OxideF-box蛋白9抗體包裝25g
呋拉茶堿英文名稱: Deuterium Oxide脂肪?;€原1抗體包裝100g
黃色海假單胞菌Pseudomonas│xanthomarina 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口殺菌性/通透性增加蛋白試劑盒七葉皂苷鈉;Sodium Aescina
: =CBS600.73=IFO9704資源名稱: 肉桂紫正青霉 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR殺菌肽試劑盒去斑蝥;Norcantharidin
擬康氏木霉Trichoderma│pseudokoningii 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品色上皮衍生因子試劑盒曲克蘆丁;Troxerutin
臺盼藍(lán)染色液無水四硼鈉
其他 無水硼砂;無水硼鈉;無水四硼;式硼鈉;焦硼鈉;硼氧化鈉;熔融硼砂;硼玻璃
英文名稱: Sodium tetraborate
其他英文名稱: Borax anhydrous;Disodium tetraborate anhydrous
產(chǎn)品規(guī)格: AR,99.5%
包裝:500克
CAS號:1330-43-4
Na2B4O7=201.22
級別:AR
含量:≥99.5%
鈣:≤200ppm
重金屬:≤50ppm
氯化物:≤500ppm
鉛:≤50ppm
水中不溶物:≤0.05%
鐵:≤50ppm
銅:≤50ppm
性狀:無臭、無色、半透明、味咸的晶體或晶狀粉末或玻璃片狀物。微溶于乙,微溶于冷水,易溶于熱水。沸點(diǎn):1575℃,熔點(diǎn):741℃,折光率: 1.501 ,密度:2.367
用途:生化研究。助熔劑。 硼砂球試驗(yàn)。
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