詳細介紹
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
7-amino-actinomycin D | 1mg | 1~3天 |
商品介紹:
本產(chǎn)品適用于細胞核酸染色,可應(yīng)用于熒光顯微鏡、激光共聚焦計或流式細胞儀檢測。7-AAD(7-amino-actinomycin D)是一種核酸染料,它不能通過正常質(zhì)膜,隨著細胞凋亡、細胞死亡過程,質(zhì)膜對7-AAD的通透性逐漸增加,結(jié)合細胞凋亡中DNA的有控降解,在合適波長激發(fā)光的激發(fā)下可發(fā)出明亮的紅色熒光,通過7-AAD標(biāo)記DNA的強弱,將細胞分為三群:7-AAD強為死亡細胞,7-AAD弱是凋亡細胞,7-AAD-為正?;盍毎?-AAD同PI有著相似的熒光特性,但其發(fā)射波譜較PI窄,對其他檢測通道的干擾更小,在多色熒光分析中是PI 的佳替代品,可與Annexin V-EGFP/FITC/PE聯(lián)合使用。 |
注意事項
1. 7-AAD 避光保存及使用。
2. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,戴手套等。
操作說明
1.超純水可配制1mg/ml 的7-AAD 儲液,避光,2-8℃保存。
2.7-AAD 的工作濃度建議為2ug/ml,可根據(jù)實驗進行微調(diào)優(yōu)化。
3.熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD 熒光信號呈紅色。
儲存:-20℃,避光,有效期12個月。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
寶藿苷V英文名稱: Barium carbonate內(nèi)皮-1抗體包裝25ml
寶藿苷VII英文名稱: Benzamide絲裂原活化蛋白激4抗體包裝5ml
杯莧甾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Biebrich scarlet埃茲蛋白抗體包裝1g
北蒼術(shù)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium citrate, tetrahydrate轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體包裝100g
北豆根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cesium sulfate內(nèi)皮-1單克抗體包裝25g
北美芹英文名稱: Copper sheet腸道病71型抗體包裝5g
北美芹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Copper(I) chloride抗志賀大腸桿菌O139抗體(仔豬腫病志賀大腸桿菌O139)包裝25g
北五加皮苷M;杠柳苷M英文名稱: Copper (I) iodide表皮生長因子抗體包裝5g
北五加皮苷N;杠柳苷N英文名稱: dGDP, 2'-Deoxyguanosine-5'-Diphosphate disodium salt表皮生長因子抗體包裝1g
貝萼皂苷元英文名稱: D-Glucuronic acid, sodium salt, monohydrate磷化真核翻譯延長因子2抗體包裝250mg
貝萼皂苷元-3- O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱: Ficol 70真核延伸因子激2抗體包裝1g
貝母花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Guanidine carbonate磷化真核延伸因子激2抗體包裝1g
貝母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hydrazine hydrochloride真核啟動因子2α抗體(eIFα2)包裝1g
貝母乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iron(III) sulfate, hydrate磷化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)抗體包裝250mg
貝母辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl gallate真核翻譯延長因子2抗體包裝5g
擬囊體側(cè)耳Pleurotus│cystidiosus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品輸血傳播病/辛型肝炎病抗原elisa試劑盒鞣花;Ellagic acid
土曲霉Aspergillus│terreus Thom 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR輸血傳播病試劑盒肉桂;Cinnamic acid
: =ATCC15835資源名稱: 棘孢小單孢菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品輸卵管特異性糖蛋白試劑盒染料木苷;Genistin
死細胞核7-AAD染料芴甲氧羰酰基-N-甲基-L-纈
其他Fmoc-N'-甲基-L-纈
英文名稱:Fmoc-N-methyl-L-valine
其他英文名稱:Fmoc-N-Me-Val-OH
產(chǎn)品規(guī)格:特純,98%
包裝:1克/5克/25克
CAS號:84000-11-3
C21H23NO4=353.41
級別:Purum
含量:≥98.0%
比旋光度:?68.0±3°(C=1% in DMF)
熔點:187~190℃
性狀:粉末或塊狀
用途:生化研究
保存:2~8℃
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。