產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒 | Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1 | >100次 | 1~3天 |
商品介紹:
本試劑盒是一種以JC-1為熒光探針,快速靈敏地檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,可以用于早期的細(xì)胞凋亡檢測(cè)。 JC-1是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針??梢詸z測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時(shí),JC-1聚集在線粒體的基質(zhì)(matrix)中,形成聚合物(J-aggregates),可以產(chǎn)生紅色熒光;在線粒體膜電位較低時(shí),JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中,此時(shí)JC-1為單體(monomer),可以產(chǎn)生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測(cè)線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對(duì)比例來衡量線粒體去極化的比例。 線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)標(biāo)志性事件。通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測(cè)到細(xì)胞膜電位的下降,同時(shí)也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)。 |
JC-1單體的最大激發(fā)波長(zhǎng)為514nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為529nm;JC-1聚合物(J-aggregates)的最大激發(fā)波長(zhǎng)為585nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為590nm。實(shí)際觀察時(shí),使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可。
本試劑盒提供了CCCP作為誘導(dǎo)線粒體膜電位下降的陽性對(duì)照。對(duì)于六孔板中的樣品,本試劑盒共可以檢測(cè)100個(gè)樣品;對(duì)于12孔中的樣品,本試劑盒共可以檢測(cè)200個(gè)樣品。
試劑盒組分:
JC-1(200X)——————100μl/管,共5管
超純水————————90ml
JC-1染色緩沖液(5X)——80ml
CCCP(10mM)——————20μl
儲(chǔ)存條件:-20℃。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
前列腺酸性磷酸酶(PAP)elisa試劑盒英文名稱:PAP ELISA Kit通道蛋白4抗體包裝5g
前列腺素G/H合酶1(PTGS1)elisa試劑盒英文名稱:PTGS1 ELISA Kit活化復(fù)制因子2抗體包裝5MG
前列腺素F(PGF)elisa試劑盒英文名稱:PGF ELISA Kit腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體包裝5MG
前列腺素E2合成酶(PGES)elisa試劑盒英文名稱:PGES ELISA Kit糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體包裝1g
前列腺素E2(PGE-2)elisa試劑盒英文名稱:PGE-2 ELISA Kit血管緊張素Ⅱ抗體包裝5g
前列腺素E2(PGE2)elisa試劑盒英文名稱:PGE2 ELISA Kit血管緊張素Ⅱ受體1抗體包裝1g
前列腺素E1(PGE1)elisa試劑盒英文名稱:PGE1 ELISA Kit血管生成素-1抗體包裝5g
前列腺素D2(PGD2)elisa試劑盒英文名稱:PGD2 ELISA Kit膜粘連蛋白5抗體包裝1g
前列環(huán)素(PGI2)elisa試劑盒英文名稱:PGI2 ELISA Kit重組膜粘連蛋白5抗體包裝5g
前白蛋白(PA)elisa試劑盒英文名稱:PA ELISA Kit銜接蛋白α-Adaptin抗體包裝1g
葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)elisa試劑盒英文名稱:GIP ELISA Kit凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)包裝250mg
葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)elisa試劑盒英文名稱:GRP78 ELISA Kit凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)包裝5g
葡萄糖激酶(GCK)elisa試劑盒英文名稱:GCK ELISA Kit三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體包裝100g
葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)elisa試劑盒英文名稱:G6PD ELISA Kit載脂蛋白E抗體包裝500g
破骨細(xì)胞分化因子(ODF)elisa試劑盒英文名稱:ODF ELISA Kit淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝100g
腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體免疫球蛋白M(IgM)Nintedanib esylate (BIBF 1120 esylate) 是一種有效的 VEGFR1/2/3,F(xiàn)GFR1/2/3 和&n
線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒植酸
其他 肌醇六磷酸;環(huán)己六醇磷酸酯;肌醇六磷酸酯;環(huán)已六醇六磷酸酯
英文名稱: Phytic acid
其他英文名稱: Cyclohexanehexyl hexapho sphate;Inositol hexaphosphoric acid;Alkalovert
產(chǎn)品規(guī)格: BR,70%
包裝:100毫升
CAS號(hào):83-86-3
C6H18O24P6=660.04
級(jí)別:BR
含量:≥70.0%
無機(jī)磷:合格
鈣:≤0.02%
性狀:淺黃色或淺褐色粘稠液體。呈強(qiáng)酸性。受熱分解。能與水、95%乙醇和甘油混溶,溶于水、乙醇的混合液,極微溶于無水乙醇和甲醇,幾乎不溶于無水苯和。其10%水溶液的pH為0.86。相對(duì)密度1.58。小致死量(兔,靜脈)45mg/kg。
用途:生化研究。絡(luò)合劑。除去微量重金屬離子。營(yíng)養(yǎng)劑。肌醇的基料。硬水處理。抑銹劑。有機(jī)合成。
保存:RT
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。