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乙型肝炎病毒cccDNA PCR試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-14 10:42:46瀏覽次數(shù):247

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號(hào) FS-P013413 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
乙型肝炎病毒cccDNA PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:Cortactin (Phospho-Tyr466) Antibody
CREB (Phospho-Ser129) Antibody
p62Dok (phospho-Tyr362) Antibody

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

乙型肝炎病毒cccDNA PCR試劑盒

50次

FS-P013413

 

QQ截圖20201022162313.png 

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。

2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,

多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),

一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

(MAG Ab)ELISA Kit 大鼠抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體Multi-class antibodies: 48T

 SYK 非受體型酪蛋白激抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat  Guinea pig IgG/PE PE標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG  0.1ml

BK(Mouse bradykinin) ELISA Kit 小鼠血管舒緩激肽 96T

NOR1 神經(jīng)元衍生孤兒受體1抗體 0.2ml

BPI /通透性增強(qiáng)蛋白抗體 0.2ml

 SYK 非受體型酪蛋白激抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

BP180-Ab(Human  Bullous Pemphigoid 180 antibody) ELISA Kit 人抗BP180抗體Multi-class antibodies: 48T

 IL-17F/IL-24 白介-17F抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Lubricin/SZP 淺表層粘膜蛋白多糖抗體  0.2ml

BALP(Human bone alkaline phosphatase) ELISA Kit 人骨性磷 96T

Rab11 ras癌基因家族Rab11蛋白抗體 0.1ml

Phospho-Cyclin B1 (Ser133) 磷化周期B1抗體 0.1ml

 IL-17F/IL-24 白介-17F抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  mouse Kappa light chain/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.5ml

GCDFP15 特異性囊腫病液體蛋白15 0.2ml

Rhesus antibody Rh Anthrax 炭疽桿菌抗體  0.2ml

 IL-21/FITC 熒光標(biāo)記白介21抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗人IgM  0.1ml

 Rbms3 protein/FITC 熒光標(biāo)記Rbms3 protein抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
乙型肝炎病毒cccDNA PCR試劑盒磚紅色微桿菌種屬: Microbacterium testaceum分離基物: Chinese paddy提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。生長條件: 30℃,好氧存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

中國臺(tái)灣鞘氨醇單胞菌種屬: Sphingomonas│formosensis分離基物: 易北河河提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 降解萘、菲和芘。培養(yǎng)基: CM0847生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

偶發(fā)分枝桿菌偶發(fā)亞種種屬: Mycobacterium│Mycobacterium fortuitum subsp fortuitum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

谷氨棒桿菌種屬: Corynebacterium│glutamicum提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)L-亮氨。培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法

角蛋白19(CK-19)ELISA試劑盒草鍶 5N,99.999%三聚硫  95%奈韋拉平

角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA試劑盒四硫磺鈉,二 98%偏硅鈉,五 95%奈韋拉平(標(biāo)準(zhǔn)品)

角蛋白18-M30(CK 18-M30)ELISA試劑盒硫-5-羥色肌酐 98%零偏硅鈉 SiO2, 44-47% 磺甲惡唑

角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒(-)-鹽東莨菪 ≥99.0% 偏硅鈉,九 AR磺甲惡唑(標(biāo)準(zhǔn)品)

角蛋白17(CK17)ELISA試劑盒(-)-鹽東莨菪 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.0% 鈦四丁酯 CP,98.0%硫頭孢匹羅

角蛋白13(CK-13)ELISA試劑盒糖精鈉 分析標(biāo)準(zhǔn)品鈦四丁酯 ≥99.0% (GC)硫頭孢匹羅(標(biāo)準(zhǔn)品)

間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒環(huán)草隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品薯蕷皂 90%阿米舒必利

間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒2,4,5-涕  分析標(biāo)準(zhǔn)品橙皮 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥98%阿米舒必利(標(biāo)準(zhǔn)品)

間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒乙鈉,無 電泳級(jí), ≥99%橙皮 97%非諾貝特

間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒十二基硫鈉 分子生物學(xué)級(jí),≥98.5% (GC)番茄紅 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95%非諾貝特(標(biāo)準(zhǔn)品)

T相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒十二基硫鈉 離子對(duì)色譜級(jí),≥99.0% (GC)胡椒 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98% 鹽莫西沙星

相關(guān)蛋白A(CagA)ELISA試劑盒化釤(III),六 99%槲皮苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%鹽莫西沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)

(CTX)ELISA試劑盒氟化銀(I)  99%白藜蘆 分析標(biāo)準(zhǔn)品昔美沙美特羅

凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒四丁酚 試劑級(jí)迷迭香 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%萘普生

凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白(PYCARD)ELISA試劑盒噻隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品2,6-二-4-三氟 98%萘普生(標(biāo)準(zhǔn)品)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)ELISA試劑盒噻隆 用于植物培養(yǎng)2,6-二-4-氨基酚 98%潑尼松


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