培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
TP-0903是具有高效性和選擇性的Axl受體酪氨酸激酶抑制劑,IC50值為27nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1341200-45-0 純度:98.94% 分子量:516.06 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大肥蘑菇鋅指蛋白IKAROS抗體Human TPSAB1(Tryptase alpha/beta-1) ELISA Kit植物L(fēng)-抗壞血過(guò)氧化物2,質(zhì)(APX2)免疫試劑盒
Arthrobacter免疫球蛋白j鏈抗體Human RTKN ELISA Kit植物1,5-二磷核糖羧化/加氧(RuBisCO)免疫試劑盒
大腸埃希菌5-三磷肌受體1抗體Human RTKN2 ELISA Kit植物(擬南芥)超氧化物歧化[銅鋅]2,葉綠體(CSD2)免疫試劑盒
糙孢藍(lán)狀菌5-三磷肌受體2抗體Human S100A14 ELISA Kit植物(擬南芥)超氧化物歧化[銅鋅]1(CSD1)免疫試劑盒
粘狀曲霉DNA結(jié)合抑制因子3抗體Human RTN1 (Isoform RTN1-C) ELISA Kit植物(擬南芥)超氧化物歧化[鐵],葉綠體(SODB)免疫試劑盒
米曲霉誘導(dǎo)協(xié)同激分子配體CD275抗體Human RTN3(Reticulon-3) ELISA Kit植物(擬南芥)超氧化物歧化[錳],線粒體(SODA)免疫試劑盒
假單胞菌屬免疫球蛋白超家族成員12抗體Human RTN2 ELISA Kit魚ELISA試劑盒
黑曲霉草酰琥珀脫羧α抗體Human RUNDC3B ELISA Kit魚組(HIS)免疫試劑盒
金黃殼囊孢菌干擾alpha 5蛋白抗體Human RTP1 ELISA Kit魚轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFB1)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌胰島樣生長(zhǎng)因子1抗體Human RUNX1T1(RUNX1 translocation partner 1) ELISA Kit魚腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒
棒曲霉KB抑制蛋白激β抗體Human RWDD1 ELISA Kit魚孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
伯頓畢赤酵母囊包蛋白/內(nèi)披蛋白抗體Human ZFHX3(Zinc finger homeobox protein 3) ELISA Kit魚乙酰膽堿酯(AChE)免疫試劑盒
托魯斯山鏈霉菌胰島受體相關(guān)受體抗體Human RWDD3 ELISA Kit魚胰島樣生長(zhǎng)因子II(IGF2)免疫試劑盒
巨大芽孢桿菌INCA1蛋白抗體Human RSF1 ELISA Kit魚胰島樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒
擬粉紅鎖擲孢酵母IQCE蛋白抗體Human RYK ELISA Kit魚胰島樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒
金色鏈霉菌雞傳染性法氏囊病病抗體Human RSK2 ELISA Kit魚胰島受體α亞基(ISR-α)免疫試劑盒
硬皮地星Astraeus│hygrometricus(Pers.)Morgan 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%β-倒捻子
: =AS1.1103資源名稱: 大腸桿菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品α-倒捻子
節(jié)桿菌Arthrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%亞麻木酚
Axl受體酪氨酸激酶抑制劑(TP-0903)鄰二酚紫
其他兒茶酚紫;鄰二酚磺酞;焦兒茶酚紫;兒茶酚磺酞;二茶酚紫;鄰二酚磺酞
英文名稱:Pyrocatechol violet
其他英文名稱:Catecholsulfonphthalein;Pyrocatecholsulfonephthalein;Catechol violet
產(chǎn)品規(guī)格:IND
包裝:5克/100克/500克
CAS號(hào):115-41-3
C19H14O7S=386.38
級(jí)別:IND
溶解試驗(yàn):合格
干燥失重:≤0.5%
灼燒殘?jiān)?/span>(以硫鹽計(jì)):≤0.1%
PH變色域 :5.2(黃)~6.8(紫)
性狀:紅色至褐色粉末,溶于水(30mg/mL)和乙(1mg/ml)
用途:生化研究。
保存:RT