詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
30T | 1~3天 |
商品介紹:
抗酒石酸酸性磷酸酶主要存在于正常人肺泡巨噬細(xì)胞等部位的TRAP和存在于細(xì)胞白血病人脾臟TRAP 均在細(xì)胞濾泡中,并不釋放入血液,血液中TRAP 絕大部分來源于破骨細(xì)胞。因而測量血液中TRAP可以了解破骨細(xì)胞的功能狀態(tài)。 |
在堿性的緩沖液中,細(xì)胞內(nèi)酸酸性磷酸酶催化底物水解,其生成物進(jìn)而與一種穩(wěn)定的重氮鹽偶聯(lián),生成不溶性的偶氮染料沉淀,當(dāng)?shù)孜镏写嬖诰剖釙r(shí),該反應(yīng)只出現(xiàn)在特異性細(xì)胞中。
本試劑盒適用于細(xì)胞涂片、細(xì)胞爬片、血涂片、骨髓涂片、冰凍切片及石蠟切片等的染色。陽性反應(yīng)為鮮紅色或深紅色顆粒,定位于胞漿當(dāng)中。
儲(chǔ)存條件及有效期:2-8℃保存;三個(gè)月。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
崗松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dimethyl sulfoxide富含亮跨膜纖連蛋白1抗體包裝10mg
杠柳次苷英文名稱: N-N-Dimethylacetamide富含亮跨膜纖連蛋白2抗體包裝50mg
杠柳苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Glycerol in water for HPLC verification富含亮跨膜纖連蛋白3抗體包裝100ml
杠柳苷元;杠柳苷元;無杠柳苷苷元英文名稱: IPC-DTMA-Cl牛纖維蛋白原抗體包裝100g
杠柳寡糖B英文名稱: IPC-DBAA (ca. 0.5mol/L in Water)FAM172A蛋白抗體包裝500g
杠柳寡糖C英文名稱: IPC-DPAA (ca. 0.5mol/L in Water)磷化粘著斑激抗體包裝5g
高車前苷英文名稱: IPC-DAAA (ca. 0.5mol/L in Water)磷化粘著斑激抗體包裝25g
高車前英文名稱: IPC-DHAA (ca. 0.5mol/L in Water)磷化脆性組三聯(lián)體抗體包裝5g
高麗紅參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: IPC-ALKS-8磷化FRA-1蛋白抗體包裝1g
高麗槐(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: IPC-ALKS-9磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝25g
高良姜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: IPC-ALKS-10磷化堿性成纖維生長因子受體1抗體包裝5g
高良姜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: IPC-ALKS-11磷化叉頭蛋白家族抗體包裝1g
高三尖杉酯堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: IPC-ALKS-12磷化叉頭蛋白3A抗體包裝5g
高山紅景天(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: IPC-ALKS-13磷化叉頭蛋白3A抗體包裝1g
高烏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: IPC-SDS磷化叉頭蛋白3A抗體包裝5g
: =ACAM34=ACM3107=ATCC49239=CIP105334=DSM50資源名稱: 湖淵鹽紅菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%腮腺炎病IgG elisa試劑盒去氫二異丁香酚;Dehydrodiiso
: JCM10272=ATCC700843=DSM15395=BCRC80020=CIP105983=IFO16685=NBRC16685資源名稱: Roseivivaxhalodurans 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品軟骨糖蛋白39試劑盒氫高烏;Lappaconitin
托姆青霉Penicillium│thomii 質(zhì)量規(guī)格:>95%軟骨寡聚蛋白試劑盒羥基檸檬;Hydroxycitric
TRAP染色試劑盒無水偏釩鈉
其他 釩鈉
英文名稱: Sodium metavanadate
其他英文名稱: Sodium vanadate(V)
產(chǎn)品規(guī)格: AR,99%
包裝:25克/100克/250克
CAS號(hào):13718-26-8
NaVO3=121.93
級(jí)別:AR
含量:≥99.0%
澄清度試驗(yàn):合格
水溶液反應(yīng):合格
氯化物:≤0.01%
硫鹽:≤0.02%
碳鹽:合格
硅鹽:≤0.1%
性狀:結(jié)晶或淺黃色結(jié)晶性粉末。易溶于水,微溶于乙。熔點(diǎn) 630℃(無水)。致死量(大鼠,經(jīng)口)200mg/kg
用途:生化研究。過硼鹽試劑。腐蝕抑制劑。植物接種。媒染劑。照相顯影。
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