培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途: 抗酸菌(結(jié)核桿菌等)染色,可鑒別抗酸菌與非抗酸菌 注意事項(xiàng): 經(jīng)典抗酸菌染色法,中國(guó)結(jié)核桿菌防治規(guī)劃痰涂片檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作,結(jié)果為:抗酸桿菌/結(jié)核桿菌呈紅色,非抗酸桿菌和背景呈藍(lán)色。主要由復(fù)紅液、脫色液、亞甲藍(lán)復(fù)染液組成。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鹽哌噻噸英文名稱: Pyrophosphoric acid魚精蛋白2抗體包裝5g
鹽英文名稱: Quininepiwi樣4蛋白抗體包裝1g
鹽黃哌酯英文名稱: Red oilpiwi樣3蛋白抗體包裝5g
鹽噻/泊酚雜質(zhì)J英文名稱: Retrorsine豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍(lán)耳病病抗體包裝100g
鹽哌英文名稱: Rhodamine B base凋亡相關(guān)蛋白10抗體包裝25g
鹽氧普英文名稱: Rhodanine鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激磷抗體包裝5g
鹽氧那明英文名稱: S-Acetylthiocholine iodide絲/蘇蛋白激PIM3抗體包裝100g
鹽金剛烷英文名稱: S-Acetylthioglycolic acid N-hydroxysuccinimide ester組蛋白精基轉(zhuǎn)移5抗體包裝25g
鹽金剛乙英文名稱: Salicyl alcohol原鈣粘附蛋白11X抗體包裝5g
鹽雷洛昔芬英文名稱: SB3-18原鈣粘附蛋白11Y抗體包裝100g
鹽雷莫司瓊英文名稱: Selenium (IV) oxide原鈣粘附蛋白12/血管內(nèi)皮鈣粘蛋白2抗體包裝25g
鹽雷尼替丁英文名稱: Sesamol原鈣粘附蛋白17抗體包裝5g
鹽英文名稱: Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白1抗體包裝1g
鹽利托君英文名稱: Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α1抗體包裝5g
鹽硫利達(dá)英文名稱: Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α3抗體包裝25ml
: =CBS462.72=IBT14679資源名稱: 嗜滲正青霉 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品果糖試劑盒結(jié)晶紫;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
枯草芽孢桿菌枯草亞種Bacillus│subtilis subsp. subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR廣州管園線蟲抗體試劑盒磺二嘧啶;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
發(fā)酵乳桿菌Lactobacillus│fermentum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品廣州管園線蟲抗體試劑盒磺噻唑;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
抗酸染色液(Ziehl-Neelsen熱染法)乳甲氧芐啶
其他2,4-二基-5-(3,4,5-氧基芐基)嘧啶乳鹽;乳甲氧芐嘧啶;甲氧芐嘧啶乳鹽;乳氧芐嘧啶
英文名稱:Trimethoprim lactate salt
其他英文名稱:2,4-Diamino-5-(3,4,5-trimethoxybenzyl)pyrimidine Lactate salt
產(chǎn)品規(guī)格:高純,98%
包裝:1克
CAS號(hào):23256-42-0
C14H18N4O3•C3H6O3=380.4
級(jí)別:High purity grade
含量:≥98.0%
性狀:粉末。溶于水,微溶于乙、
用途:生化研究。
保存:2~8℃。保質(zhì)期5年
保存:RT