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曲霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒50次

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更新時間:2022-04-14 13:12:55瀏覽次數(shù):200

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013513 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
曲霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒50次正在出售的產(chǎn)品:人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒DMEM*培養(yǎng)液(無抗生素)
520-27-4標(biāo)準(zhǔn)品RPMI 1640*培養(yǎng)液
3681-99-0標(biāo)準(zhǔn)品RPMI 1640*培養(yǎng)液(無抗生素)
123350-57-2標(biāo)準(zhǔn)品淋巴細(xì)胞*培養(yǎng)液

詳細(xì)介紹

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

曲霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒50次

50次

FS-P013513

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

QQ截圖20201022162313.png 

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

Human Centromere Protein,CENP-B ELISA Kit 人著絲粒蛋白BMulti-class antibodies: 48T

 SP-D 肺表面活性蛋白D抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat  Mouse IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的羊抗小鼠IgG  0.1ml

Cyclin-D2(Mouse Cyclin-D2) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞周期D2 96T

NADPH 還原型Ⅱ/磷酰胺腺二核苷抗體 0.1ml

BDNF 腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 0.1ml

 SP-D 肺表面活性蛋白D抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Beta-Nph(Human Beta-naphthol) ELISA Kit 人β萘酚Multi-class antibodies: 48T

 PG-C 胃蛋白原C抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Histone H3 (Di Methyl K36) 二甲基化組蛋白H3抗體  0.1ml

LFA-3/CD58 ELISA Kit 大鼠細(xì)胞功能相關(guān)抗原3 96T

PRPS1L1 蛋白體復(fù)合物C5抗體 0.1ml

C7orf69 7號染色體開放閱讀框69抗體 0.2ml

 PG-C 胃蛋白原C抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  Mink IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml

GAB4 生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ARHI 抑癌基因ras同源家族1抗體  0.2ml

 IGFBP-4/IBP4/FITC 熒光標(biāo)記胰島樣生長因子結(jié)合蛋白-4抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  MK IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗猴IgM  0.1ml

 PMP-22/FITC 熒光標(biāo)記外周髓鞘蛋白-22IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
曲霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒50次馬紅球菌種屬: Rhodococcus equi提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究;分析檢測。研究、質(zhì)量控制,《GB 4789.30-2010單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)》陰性對照菌株。培養(yǎng)基: 腦心瓊脂 :心提取物 5.0g,腦提取物 12.5g,月示 胨10.0g,葡萄糖 2.0g,NaCl 5.0g,Na2HPO4 2.5g,瓊脂15.0g,蒸餾1.0L,pH7.4。生長條件: 37℃,兼性厭氧。生長特性: G+球菌,接觸陽性,尿陽性,無動力,生化反應(yīng)不活潑,不發(fā)酵任何糖類和醇類。兼性厭氧。存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;2-8℃,真空冷凍干燥法

丁香直絲鏈霉菌種屬: Streptomyces│lilacinorectus提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 篩選培養(yǎng)基: 12生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

福氏志賀氏菌種屬: Shigella│flexneri提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: B 1b I 4,6...培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

溜曲霉種屬: Aspergillus│tamarii提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0089生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

復(fù)制蛋白A(RPA-70)ELISA試劑盒D-半胱氨鹽鹽一物 98%異佛手柑內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%6-糠基氨基,激動

復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒DL-半胱氨 97%異古倫賓 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%乙二雙(2-氨基乙基)四乙

附睪蛋白4(HE4)ELISA試劑盒D-谷氨 98%異葒草 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98% 無二氫鈉(分子生物學(xué)級)

Q10(CoQ10)ELISA試劑盒L-高精氨鹽鹽 98%異麥角甾苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%月桂酰基肌氨鈉(分子生物學(xué)級)

封閉抗體(BA)ELISA試劑盒L-高絲氨 98%異鼠李-3-O-新橙皮糖苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%硫鎳六

封閉蛋白4(CLDN4)ELISA試劑盒D-組氨 99%異飛薊賓 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%乙銨(分子生物學(xué)級)

分泌性白蛋白抑制因子(SLPI)ELISA試劑盒L-高氨 98%棗仁皂苷 A 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%微晶纖維(100 um)

分泌型球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒DL-組氨鹽鹽 BR棗仁皂苷 B  分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%乳糖;α-乳糖,一

分泌型脂A2(sPLA2)ELISA試劑盒DL-高氨 98%鹽藥根 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%化鈣二

分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)ELISA試劑盒DL-異亮氨 98%醉椒 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%乙二

分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)ELISA試劑盒D-異亮氨 98%石松靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%硫鎂七(分子生物學(xué)級)

分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)ELISA試劑盒D-別異亮氨 98%蓮心 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%糖化;葡萄糖淀粉

分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)ELISA試劑盒DL-亮氨 98%羽扇豆 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%乙酰

分泌粒蛋白1(嗜鉻粒蛋白B)(CHGB/SCG1)ELISA試劑盒L-叔亮氨 99%石蒜裂 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98% 聚乙二4000

分泌成分(SC)ELISA試劑盒DL-賴氨 99%羥基積雪草苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%無氫二

肺炎支原體抗體(MP-Ab)ELISA試劑盒D-亮氨 99%羥基積雪草苷 98%甲酰


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