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詳細介紹
中文名稱：細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)
英文名稱：Cell proliferation tracer fluorescence probe
產(chǎn)品規(guī)格：5mg
發(fā)貨周期：1～3天
本品是一種近年來被廣泛應用的細胞增殖檢測用熒光探針，也可以用于細胞的熒光示蹤?；?/span>CFDA SE熒光標記的細胞增殖檢測和[3H]-thymidine摻入、BrdU標記獲得的檢測結(jié)果*一致，但同時可以提供更多的細胞增殖信息。使用CFDA SE檢測可以提供整個細胞群中有多少比例的細胞分裂了1次、2次或更多次數(shù)，同時如果和其它熒光探針聯(lián)用，可以獲取不同分裂次數(shù)細胞的其它相關(guān)信息。 |
CAS：150347-59-4
分子式：C29H19NO11
分子量：557.47
CFDA SE可以通透細胞膜，進入細胞后可以被細胞內(nèi)的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，CFSE可以偶發(fā)性地(spontaneously)并不可逆地和細胞內(nèi)蛋白的Lysine殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應，并標記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時，即可充分標記細胞。被CFDA SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標記的時間可達數(shù)個月。CFDA SE標記細胞的熒光非常均一，比以前使用的其它細胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一，并且 分裂后的子代細胞的熒光分配也更均勻。
由于CFDA SE標記細胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定，每分裂一次子代細胞的熒光會減弱一半，這樣通過流式細胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細胞，分裂一次的細胞(1/2的熒光強度)，分離兩次的細胞(1/4的熒光強度)，分裂三次的細胞(1/8的熒光強度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細胞。采用CFDA SE通過流式細胞儀檢測獲得的檢測結(jié)果參考右圖。每一個峰代表一種分裂次數(shù)的細胞，從右至左的峰通常依次為分裂0次、1次、2次、3次等次數(shù)的細胞。分裂次數(shù)較多后，分裂0次或1次等沒有分裂或分裂次數(shù)較少的細胞會逐漸減少直至檢測不到。
使用CFDA SE可以檢測分裂多達8次或更多次數(shù)的細胞增殖。目前CFDA SE標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可以用于成纖維細胞、NK細胞等其它細胞的增殖檢測，甚至還可以用于細菌增殖的檢測。
CFDA SE標記細胞呈綠色熒光，檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為518nm，使用流式細胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。CFDA SE標記的細胞也可以用熒光顯微鏡進行觀察。 CFDA SE標記的細胞無論在體外還是體內(nèi)都不會使鄰近細胞染色。即CFDA SE熒光探針完成標記后不會從一個細胞轉(zhuǎn)移到鄰近細胞。CFDA SE標記細胞僅需5-15分鐘即可完成。對于不同細胞，最佳標記時間需自行摸索。
CFDA SE可以使用無水DMSO(anhydrous DMSO)配制，配制濃度通常為2-10mM。配制好的溶液宜當天使用完畢，不宜長時間保存。CFDA SE標記細胞時的最終濃度通常為0.2-10μM或更高一些。在工作濃度為5μM時，一個包裝的本產(chǎn)品共可以標記約1.8升的細胞。
儲存條件：-20℃，有效期6個月。
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
操作規(guī)程：
1、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
蘋果酸脫氫酶(MDH)elisa試劑盒英文名稱：MDH ELISA Kit通道蛋白-2抗體包裝25g
嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP)elisa試劑盒英文名稱：PNP ELISA Kit血管緊張素原抗體包裝10MG
皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)elisa試劑盒英文名稱：CORT ELISA Kit雄激素受體抗體包裝10MG
皮質(zhì)醇(Cortisol)elisa試劑盒英文名稱：Cortisol ELISA Kit死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱酸蛋白酶激活抑制劑)包裝25g
胚胎干細胞系MESPU30(M30)elisa試劑盒英文名稱：M30 ELISA Kit軸蛋白1抗體包裝5g
膀胱腫瘤抗原(BTA)elisa試劑盒英文名稱：BTA ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白9B抗體包裝25ml
牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)elisa試劑盒英文名稱：CIAP ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白12抗體包裝5ml
凝血因子XIII B(F13B)elisa試劑盒英文名稱：F13B ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白13抗體包裝25g
凝血因子XIII A1(F13A1)elisa試劑盒英文名稱：F13A1 ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白3抗體包裝5g
凝血因子VIIIa輕鏈(F8aLC)elisa試劑盒英文名稱：F8aLC ELISA Kit整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶4型抗體包裝100mg
凝血因子Ⅻ(FⅫ)elisa試劑盒英文名稱：FⅫ ELISA Kit磷酸化活化復制因子2抗體包裝25g
凝血因子Ⅺ(FⅪ)elisa試劑盒英文名稱：FⅪ ELISA Kit磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝5g
凝血因子Ⅹ(FⅩ)elisa試劑盒英文名稱：FⅩ ELISA Kit絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ATR抗體包裝10g
凝血因子Ⅸ(FⅨ)elisa試劑盒英文名稱：FⅨ ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶18抗體包裝250g
凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)elisa試劑盒英文名稱：FⅧ-Ag ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體包裝50g
腺苷酸激酶抗體免疫球蛋白G(IgG)Nintedanib (BIBF 1120) is a potent triple angiokinase inhibitor for VEGFR1/2/3,
細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)直鏈淀粉
其他糖淀粉
英文名稱：Amylose from potato
產(chǎn)品規(guī)格：BR，土豆來源
包裝：250毫克/1克/5克
CAS號：9005-82-7
分子式：(C6H10O5)n
級別：BR
類型：Type III
雜質(zhì)：≤10% butanol
Solubility：1 mg/ml, 0.05 M NaOH
用途：生化研究。測定麥芽淀粉糖化活力。碘量滴定分析法指示劑。血液非蛋白氮的檢驗。測定血清鈉
保存：RT
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