中文名稱:細(xì)胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)
英文名稱:Cell proliferation tracer fluorescence probe
產(chǎn)品規(guī)格:5mg
發(fā)貨周期:1~3天
本品是一種近年來(lái)被廣泛應(yīng)用的細(xì)胞增殖檢測(cè)用熒光探針,也可以用于細(xì)胞的熒光示蹤。基于CFDA SE熒光標(biāo)記的細(xì)胞增殖檢測(cè)和[3H]-thymidine摻入、BrdU標(biāo)記獲得的檢測(cè)結(jié)果*一致,但同時(shí)可以提供更多的細(xì)胞增殖信息。使用CFDA SE檢測(cè)可以提供整個(gè)細(xì)胞群中有多少比例的細(xì)胞分裂了1次、2次或更多次數(shù),同時(shí)如果和其它熒光探針聯(lián)用,可以獲取不同分裂次數(shù)細(xì)胞的其它相關(guān)信息。 |
CAS:150347-59-4
分子式:C29H19NO11
分子量:557.47
CFDA SE可以通透細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶發(fā)性地(spontaneously)并不可逆地和細(xì)胞內(nèi)蛋白的Lysine殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng),并標(biāo)記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時(shí),即可充分標(biāo)記細(xì)胞。被CFDA SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定,穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)個(gè)月。CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,比以前使用的其它細(xì)胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一,并且 分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均勻。
由于CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定,每分裂一次子代細(xì)胞的熒光會(huì)減弱一半,這樣通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)就可以檢測(cè)出沒(méi)有分裂的細(xì)胞,分裂一次的細(xì)胞(1/2的熒光強(qiáng)度),分離兩次的細(xì)胞(1/4的熒光強(qiáng)度),分裂三次的細(xì)胞(1/8的熒光強(qiáng)度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細(xì)胞。采用CFDA SE通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)獲得的檢測(cè)結(jié)果參考右圖。每一個(gè)峰代表一種分裂次數(shù)的細(xì)胞,從右至左的峰通常依次為分裂0次、1次、2次、3次等次數(shù)的細(xì)胞。分裂次數(shù)較多后,分裂0次或1次等沒(méi)有分裂或分裂次數(shù)較少的細(xì)胞會(huì)逐漸減少直至檢測(cè)不到。
使用CFDA SE可以檢測(cè)分裂多達(dá)8次或更多次數(shù)的細(xì)胞增殖。目前CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)。常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè),也可以用于成纖維細(xì)胞、NK細(xì)胞等其它細(xì)胞的增殖檢測(cè),甚至還可以用于細(xì)菌增殖的檢測(cè)。
CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,檢測(cè)時(shí)的激發(fā)波長(zhǎng)可以選擇488nm,此時(shí)的發(fā)射波長(zhǎng)為518nm,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)可以采用FL1 detection channel。CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞也可以用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。 CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞無(wú)論在體外還是體內(nèi)都不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色。即CFDA SE熒光探針完成標(biāo)記后不會(huì)從一個(gè)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到鄰近細(xì)胞。CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞僅需5-15分鐘即可完成。對(duì)于不同細(xì)胞,最佳標(biāo)記時(shí)間需自行摸索。
CFDA SE可以使用無(wú)水DMSO(anhydrous DMSO)配制,配制濃度通常為2-10mM。配制好的溶液宜當(dāng)天使用完畢,不宜長(zhǎng)時(shí)間保存。CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞時(shí)的最終濃度通常為0.2-10μM或更高一些。在工作濃度為5μM時(shí),一個(gè)包裝的本產(chǎn)品共可以標(biāo)記約1.8升的細(xì)胞。
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期6個(gè)月。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
蘋(píng)果酸脫氫酶(MDH)elisa試劑盒英文名稱:MDH ELISA Kit通道蛋白-2抗體包裝25g
嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP)elisa試劑盒英文名稱:PNP ELISA Kit血管緊張素原抗體包裝10MG
皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)elisa試劑盒英文名稱:CORT ELISA Kit雄激素受體抗體包裝10MG
皮質(zhì)醇(Cortisol)elisa試劑盒英文名稱:Cortisol ELISA Kit死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱酸蛋白酶激活抑制劑)包裝25g
胚胎干細(xì)胞系MESPU30(M30)elisa試劑盒英文名稱:M30 ELISA Kit軸蛋白1抗體包裝5g
膀胱腫瘤抗原(BTA)elisa試劑盒英文名稱:BTA ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白9B抗體包裝25ml
牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)elisa試劑盒英文名稱:CIAP ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白12抗體包裝5ml
凝血因子XIII B(F13B)elisa試劑盒英文名稱:F13B ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白13抗體包裝25g
凝血因子XIII A1(F13A1)elisa試劑盒英文名稱:F13A1 ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白3抗體包裝5g
凝血因子VIIIa輕鏈(F8aLC)elisa試劑盒英文名稱:F8aLC ELISA Kit整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶4型抗體包裝100mg
凝血因子Ⅻ(FⅫ)elisa試劑盒英文名稱:FⅫ ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝25g
凝血因子Ⅺ(FⅪ)elisa試劑盒英文名稱:FⅪ ELISA Kit磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝5g
凝血因子Ⅹ(FⅩ)elisa試劑盒英文名稱:FⅩ ELISA Kit絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ATR抗體包裝10g
凝血因子Ⅸ(FⅨ)elisa試劑盒英文名稱:FⅨ ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶18抗體包裝250g
凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)elisa試劑盒英文名稱:FⅧ-Ag ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體包裝50g
腺苷酸激酶抗體免疫球蛋白G(IgG)Nintedanib (BIBF 1120) is a potent triple angiokinase inhibitor for VEGFR1/2/3,
細(xì)胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)直鏈淀粉
其他糖淀粉
英文名稱:Amylose from potato
產(chǎn)品規(guī)格:BR,土豆來(lái)源
包裝:250毫克/1克/5克
CAS號(hào):9005-82-7
分子式:(C6H10O5)n
級(jí)別:BR
類型:Type III
雜質(zhì):≤10% butanol
Solubility:1 mg/ml, 0.05 M NaOH
用途:生化研究。測(cè)定麥芽淀粉糖化活力。碘量滴定分析法指示劑。血液非蛋白氮的檢驗(yàn)。測(cè)定血清鈉
保存:RT