操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:Caspase 9熒光法檢測(cè)試劑盒(AFC)
英文名稱:Caspase-9 Fluorescence Metric Assay
產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒適用于培養(yǎng)細(xì)胞及新鮮組織Caspase-9 檢測(cè)。Caspase 家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中Caspase-9 為關(guān)鍵的執(zhí)行分子,與DNA 斷裂、染色質(zhì)凝聚和凋亡小體形成有關(guān)。Caspase-9 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中,沒有活性;但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段,它被激活,活化的Caspase-9 由兩個(gè)大亞基和兩個(gè)小亞基組成,裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物,最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase-9 熒光檢測(cè)試劑盒就是將Caspase-9 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán)。當(dāng)?shù)孜锉籆aspase-9 剪切后,發(fā)色基團(tuán)即游離出來(lái),可通過熒光酶標(biāo)儀測(cè)定其熒光強(qiáng)度(激發(fā)波長(zhǎng)=485nm,發(fā)射波長(zhǎng)=535nm)。 |
注意事項(xiàng)
1. Caspase-9 Substrate 避光保存及使用。
2. 對(duì)某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-9 活化的機(jī)制,這種情況時(shí)利用本試劑盒檢測(cè)Caspase-9 活性無(wú)明顯改變,需要考慮凋亡機(jī)制中的其他信號(hào)通路。
3. 細(xì)胞數(shù)量需達(dá)到3~5×106 個(gè)或新鮮組織50~100mg,以便能達(dá)到測(cè)定需要的100~200μg 蛋白的要求,因?yàn)镃aspase-9 的活性與細(xì)胞裂解液的蛋白含量有關(guān),如測(cè)定的RFU 值偏低,可以通過適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)的時(shí)間,如果值還是不高,可通過增加細(xì)胞數(shù)量或組織量的方法來(lái)提高蛋白量。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
白介素2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)elisa試劑盒英文名稱:sIL-2Rα/CD25 ELISA Kit通道蛋白5抗體包裝1g
白介素29(IL-29)elisa試劑盒英文名稱:IL-29 ELISA Kitβ淀粉樣肽(1-40)抗體包裝5g
白介素28A(IL-28A)elisa試劑盒英文名稱:IL-28A ELISA Kitβ淀粉樣肽(1-42)抗體包裝1g
白介素28(IL-28)elisa試劑盒英文名稱:IL-28 ELISA Kit載脂蛋白A1抗體包裝25g
白介素27(IL-27)elisa試劑盒英文名稱:IL-27 ELISA Kitβ-抑制蛋白1抗體包裝5g
白介素27(IL-27)elisa試劑盒英文名稱:IL-27 ELISA Kit錨定蛋白B抗體包裝500g
白介素25(IL25/C19orf10)elisa試劑盒英文名稱:IL25/C19orf10 ELISA Kit銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)α鏈抗體包裝1g
白介素23(IL-23)elisa試劑盒英文名稱:IL-23 ELISA Kit單克隆/抗體包裝5g
白介素23(IL-23)elisa試劑盒英文名稱:IL-23 ELISA KitASMTL蛋白抗體包裝10MG
白介素22(IL-22)elisa試劑盒英文名稱:IL-22 ELISA Kit激素受體相關(guān)蛋白16抗體包裝1g
白介素2(IL-2)elisa試劑盒英文名稱:IL-2 ELISA Kitβ淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗體包裝5g
白介素2(IL-2)elisa試劑盒英文名稱:IL-2 ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族13抗體包裝25g
白介素1受體相關(guān)激酶1(IRAK1)elisa試劑盒英文名稱:IRAK1 ELISA Kitβ淀粉樣肽(31-35)/Aβ 31-35 抗體包裝100g
白介素1受體拮抗劑(IL1Ra/CD121)elisa試劑盒英文名稱:IL1Ra/CD121 ELISA Kitβ淀粉樣肽 1-40(C端)抗體包裝25g
白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa試劑盒英文名稱:IL1Ra ELISA Kitβ-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2/β-arrestin抗體包裝5g
膜粘連蛋白13抗體基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10)AG-18 inhibits EGFR with IC50 of 35 μM.
Caspase 9熒光法檢測(cè)試劑盒(AFC)玉米蛋白
其他黍膠質(zhì);玉米朊;玉米溶蛋白
英文名稱:Zein
產(chǎn)品規(guī)格:BR,13-16%
包裝:25克/100克
CAS號(hào):9010-66-6
級(jí)別:BR
含量:13~16%
水分:≤8.0%
性狀:粉末、粒狀或薄片狀。玉米的蛋白質(zhì)。密度約1.226。能溶于90%乙、、乙、酚等,也能溶于1.4%苛性鈉或1.97%苛性鉀水溶液。不溶于水,但能吸收水分2%~10%。未干燥時(shí)或在溶劑內(nèi)放置日久,即變性而難溶于上述溶劑。在干燥狀態(tài)下,在135℃以下也不分解
用途:生化研究??捎米魅龏A板和軟木板膠合劑、發(fā)泡劑、乳化劑,也用于制涂料、水溶性油墨和化學(xué)纖維等。
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